Multifunkční úloha hormonálně citlivé lipázy v metabolismu lipidů

Hormonálně citlivá lipáza (HSL) je enzym s poměrně širokou specifitou, který má schopnost hydrolyzovat tri-, di- a monoacylglyceroly i estery cholesterolu a malé ve vodě rozpustné substráty. Tato široká specifita umožňuje HSL plnit různé funkce v několika tkáních. Klíčovou vlastností HSL je její schopnost aktivace fosforylací cyklickou AMP-dependentní proteinkinázou. Kromě toho je fosforylována na druhém místě několika kinázami, zejména AMP-aktivovanou proteinkinázou. Fosforylace tohoto místa zřejmě hraje roli v tom, že enzym je hormonálně necitlivý, protože předchozí fosforylace na místě 2 zabraňuje fosforylaci a aktivaci na místě 1 cyklickou AMP-dependentní proteinkinázou. Zkoumání proteinových fosfatáz odpovědných za defosforylaci těchto míst ukázalo, že převažující roli hraje fosfatáza 2A, ale také že proteinová fosfatáza 2C je významnou fosfatázou zaměřenou proti oběma fosforylačním místům. Důkazy naznačují, že HSL má nejméně tři funkční domény, které obsahují a) fosforylační místa, která řídí aktivitu, b) aktivní místo odpovědné za katalytickou aktivitu a c) lipidové vazebné místo odpovědné za ukotvení lipázy na rozhraní voda-lipid. Pomocí omezených proteolytických studií jsme zjistili, že je možné HSL rozštěpit na několik fragmentů včetně stabilní domény M(r) přibližně 17,6 kDa, která obsahuje serinový zbytek v aktivním místě. Štěpením za podobných podmínek vzniká také stabilní doména M(r) přibližně 11,5 kDa obsahující obě fosforylační místa. Kromě toho je za vhodných podmínek možné trávit HSL a zachovat aktivitu vůči substrátům rozpustným ve vodě, ale se současnou ztrátou aktivity vůči triacylglycerolu, což naznačuje, že při tomto postupu dochází ke ztrátě domény vázající lipidy. HSL je zodpovědná za aktivitu neutrální cholesterolesterázy v makrofázích a může hrát roli při hromadění esterů cholesterolu, ke kterému dochází během vývoje pěnových buněk. Aktivita HSL je v pěnových buňkách makrofágů snížena, přinejmenším částečně v důsledku zvýšené aktivity cytosolického inhibičního proteinu HSL. Po mnoho let nevysvětleným zjištěním bylo, že ačkoli lipolýzu lze v adipocytech stimulovat 50-100krát lipolytickými hormony, HSL lze zřejmě aktivovat pouze 2-3krát prostřednictvím fosforylace in vitro cyklickou AMP-dependentní proteinkinázou. Jednou z možností, jak vysvětlit tento rozpor, je, že v systému in vitro chybí další kotevní protein, a pro takový protein se nyní hromadí nepřímé důkazy.

Napsat komentář

Vaše e-mailová adresa nebude zveřejněna.