La lipasi ormono-sensibile (HSL) è un enzima di relativamente ampia specificità, avendo la capacità di idrolizzare tri-, di- e mono-acilgliceroli così come esteri di colesterolo e piccoli substrati solubili in acqua. Questa ampia specificità permette all’HSL di svolgere una varietà di funzioni in diversi tessuti. Una caratteristica chiave di HSL è la sua capacità di essere attivato tramite fosforilazione da parte della protein chinasi ciclica AMP-dipendente. Inoltre è fosforilato in un secondo sito da diverse chinasi, in particolare dalla protein chinasi attivata dall’AMP. La fosforilazione di questo sito gioca apparentemente un ruolo nel rendere l’enzima insensibile agli ormoni, in quanto la fosforilazione preliminare al sito 2 impedisce la fosforilazione e l’attivazione al sito 1 da parte della protein chinasi AMP-dipendente ciclica. Lo studio delle fosfatasi proteiche responsabili della defosforilazione di questi siti ha indicato che la fosfatasi 2A gioca un ruolo predominante, ma anche che la fosfatasi 2C è una fosfatasi significativa mirata contro entrambi i siti di fosforilazione. L’evidenza indica che HSL ha almeno tre domini funzionali che contengono (a) i siti di fosforilazione che controllano l’attività, (b) il sito attivo responsabile dell’attività catalitica e (c) un sito di legame lipidico responsabile dell’ancoraggio della lipasi all’interfaccia acqua-lipide. Utilizzando studi proteolitici limitati abbiamo scoperto che è possibile scindere HSL in diversi frammenti tra cui un dominio stabile di M(r) circa 17,6 kDa che contiene il residuo di serina del sito attivo. La digestione in condizioni simili genera anche un dominio stabile di M(r) di circa 11,5 kDa che contiene entrambi i siti di fosforilazione. Inoltre, in condizioni appropriate è possibile digerire HSL e mantenere l’attività contro substrati idrosolubili ma con la concomitante perdita di attività contro il triacilglicerolo, implicando che un dominio di legame lipidico viene perso durante questa procedura. HSL è responsabile dell’attività di colesterolo esterasi neutra nei macrofagi e può svolgere un ruolo nell’accumulo di esteri di colesterolo che si verifica durante lo sviluppo delle cellule schiumose. L’attività di HSL è ridotta nelle cellule schiumose dei macrofagi, almeno in parte a causa dell’aumento dell’attività di una proteina citosolica inibitrice di HSL. Una scoperta inspiegabile per molti anni è stata che, anche se la lipolisi può essere stimolata 50-100 volte negli adipociti dagli ormoni lipolitici, HSL può apparentemente essere attivato solo 2-3 volte attraverso la fosforilazione in vitro dalla protein chinasi ciclica AMP-dipendente. Una possibilità per spiegare questa discrepanza è che un’ulteriore proteina di ancoraggio manca nel sistema in vitro e le prove indirette si stanno accumulando per tale proteina.