Den mest fordelagtige egenskab ved vævskultur er evnen til at bruge “et stykke væv fra en hvilken som helst del af planten” til at dyrke en anden plante. Andre fordele omfatter produktion af et stort antal planter på kortere tid i forhold til konventionelle teknikker, produktion af sygdomsfrie planter osv.

Det stykke plantevæv, der placeres på vækstmediet, kaldes eksplantatet. Selv om det er kendt, at ethvert plantevæv kan bruges til at dyrke hele planten, er der nogle betingelser, der anvendes! Der er kun en type plantevæv, som ikke er egnet til at dyrke alle arter af planter i vævskultur. Nogle faktorer bestemmer, hvilken explant der vil være egnet til din kultur; ved omhyggeligt at vælge sunde explanter til din kultur kan du øge kulturens produktivitet mangedoblet.

Denne artikel forklarer, hvilken slags explanter der anvendes i vævskultur, og hvilke faktorer der bør tages i betragtning, mens du vælger explanter.

Typer af explanter, der anvendes i vævskultur

Alle plantedele kan anvendes som explanter til vævskulturformål: blade, stængler, en del af skud, blomster, støvknapper, æggestokke, enkelte udifferentierede celler eller modne væv. Cellerne skal dog være i stand til at de-differentiere og genoptage celledeling og have cytoplasma.

Visse dele, som f.eks. rodspidsen, anvendes sjældent som eksplantater til vævskulturprocesser. Rodspidser er vanskelige at isolere og indeholder mikrober i deres væv, der danner en stærk forbindelse med dem. Desuden er jordpartikler knyttet til rødderne, som er vanskelige at fjerne uden at beskadige nogle væv.

Faktorer, der skal tages i betragtning ved valg af explanter

1. Alder af det organ, der anvendes til at fremskaffe eksplantatet

Eksplantatets alder er en vigtig faktor ved valg af det rigtige eksplantat. Det anbefales af forskere at bruge unge dele som vævskilde til dyrkning, fordi yngre væv korrelerer med bedre fysiologiske reaktioner i laboratorieforskning. Da unge væv er nyligt genereret, er de bedre egnede til den grove proces med overfladesterilisering. Overfladesterilisering er en proces, der potentielt kan beskadige væv, og som hjælper med at etablere rene kulturer.

2. Hvornår eksplantatet blev indsamlet

Den årstid, hvor eksplantatet er indsamlet, påvirker dets kontaminering og vækstrespons i kultur. Forskellige årstider har forskellige virkninger på eksplantaterne. Eksempelvis reagerer eksplantater (som knopper eller skud), der indsamles om foråret (mens de er i deres spæde tilstand), bedre end eksplantater, der indsamles om vinteren (mens de er i dvaletilstand).

De hvilende explanter er generelt ikke lydhøre i kultur, hvilket betyder, at de skal gennemgå flere kemiske behandlinger for at blive lydhøre over for vævsdyrkningsprocesser. Desuden øges risikoen for kontaminering også mod vintertiden.

3. Eksplantatets størrelse og placering

Mindre eksplantater er vanskelige at dyrke og er mindre responsive end eksplantater af større størrelse. Større vævsstykker indeholder tilstrækkelige næringsreserver og plantevækstregulatorer til at stimulere deres vækst i kulturer. Mindre explanter kræver yderligere komponenter for at opretholde kulturen.

Den anden faktor, der afgør kulturernes sundhed, er kilden til udvinding fra planten. For eksempel viser en rapport offentliggjort af Tran Thah Van (1977), at afhængigt af, om eksploranterne tages fra basis, midten eller toppen af stammen, varierer vækstregulatorer i eksploranterne også. Niveauet af væksthormoner i eksploraterne viser forskellige in vitro-reaktioner.

4. Kvaliteten af kildeplanten

Plantens sundhed er en væsentlig faktor, der skal tages i betragtning, inden man udtager eksplantatet. Forskere anbefaler, at man tager eksplantater fra sunde planter sammenlignet med planter under ernærings- eller vandstress eller med sygdomssymptomer.

5.Formålet med vævskultur

Hvor man vælger eksplantat til sin kultur, bør man overveje, hvilken værdi man ønsker at få ud af kulturen. Afhængigt af den ønskede respons varierer valget af eksplantater. For eksempel vil den egnede explant til klonformering være et lateralt eller terminalt knopskud eller skud; til callusinduktion anvendes normalt stykker af cotyledonet, hypokotyl, stængel, blad eller embryo. Til haploid produktion dyrkes anther eller pollen.

6. Plantegenotype

Alle arter af planter reagerer ikke lige godt på vævskultur. Der er store forskelle mellem forskellige genotyper, arter eller kultivarer, hvilket gør nogle let dyrkbare og andre ikke-responsive eller genstridige.

Shoppe vores plantebeskyttelsesprodukter i dag!

1. Smith, R. H. (2013). Eksplantationsforberedelse. Plant Tissue Culture, 45-51. doi:10.1016/b978-0-12-415920-4.00004-9
3. Kubota, C. (2001). Koncepter og baggrund for fotoautotrofisk mikroforplantning. Molecular Breeding of Woody Plants, Proceedings of the International Wood Biotechnology Symposium (IWBS), 325-334. doi:10.1016/s0921-0423(01)80089-7
4. https://en.wikipedia.org/wiki/Plant_tissue_culture…