Nejvýhodnější vlastností tkáňové kultury je možnost využít „jakýkoli kousek tkáně z jakékoli části rostliny“ k vypěstování jiné rostliny. Mezi další výhody patří produkce velkého množství rostlin v kratší době ve srovnání s konvenčními technikami, produkce rostlin bez chorob atd.

Kus rostlinného pletiva, který je umístěn na růstové médium, se nazývá explantát. Ačkoli je známo, že jakákoli rostlinná tkáň může být použita k vypěstování celé rostliny, platí zde určité podmínky! Existuje pouze typ rostlinné tkáně, který není vhodný k pěstování všech druhů rostlin v tkáňové kultuře. Některé faktory určují, který explantát bude vhodný pro vaši kulturu; pečlivým výběrem zdravých explantátů pro vaši kulturu můžete mnohonásobně zvýšit produktivitu kultury.

Tento článek vysvětluje, jaké druhy explantátů se používají v tkáňových kulturách, a faktory, které je třeba při výběru explantátů zvážit.

Typy explantátů používaných v tkáňových kulturách

Jako explantáty pro účely tkáňových kultur lze použít všechny části rostlin: listy, stonky, část výhonů, květy, prašníky, vaječníky, jednotlivé nediferencované buňky nebo zralá pletiva. Buňky by však měly být schopné de-diferenciace a obnovení buněčného dělení a měly by mít cytoplazmu.

Některé části, jako například špička kořene, se jako explantáty pro procesy tkáňových kultur používají zřídka. Kořenové špičky se obtížně izolují a ve svých tkáních obsahují mikroby, které s nimi vytvářejí silné spojení. Na kořenech jsou také navázány půdní částice, které je obtížné odstranit, aniž by došlo k poškození některých tkání.

Faktory, které je třeba zvážit při výběru explantátů

1. Stáří orgánu použitého jako zdroj explantátu

Stáří explantátu je důležitým faktorem při výběru správného explantátu. Vědci doporučují používat mladé části jako zdroj tkáně pro kultivaci, protože mladší tkáně korelují s lepšími fyziologickými reakcemi v laboratorním výzkumu. Protože mladé tkáně jsou nově vytvořené, jsou vhodnější pro drsný proces povrchové sterilizace. Povrchová sterilizace je proces, který může potenciálně poškodit tkáň a pomáhá vytvořit čisté kultury.

2. Kdy byl explantát odebrán

Roční období, ve kterém byl explantát odebrán, ovlivňuje jeho kontaminaci a růstovou odezvu v kultuře. Různá roční období mají na explantáty různý vliv. Například explantáty (jako pupeny nebo výhonky) odebrané na jaře (ve stavu rašení) jsou citlivější ve srovnání s explantáty odebranými v zimním období (ve stavu klidu).

Explantáty v dormantním stavu jsou v kultuře obecně nereaktivní, což znamená, že musí projít několika chemickými ošetřeními, aby byly citlivé na procesy kultivace tkání. Navíc se směrem k zimnímu období také zvyšuje pravděpodobnost kontaminace.

3. Velikost a místo explantátu

Menší explantáty se obtížně kultivují a jsou méně citlivé než explantáty větších rozměrů. Větší kusy tkání obsahují dostatek zásob živin a regulátorů růstu rostlin, které stimulují jejich růst v kulturách. Menší explantáty vyžadují další složky pro udržení kultury.

Dalším faktorem, který rozhoduje o zdraví kultur, je zdroj extrakce z rostliny. Například zpráva, kterou publikoval Tran Thah Van (1977), ukazuje, že v závislosti na tom, zda jsou explantáty odebrány z báze, středu nebo vrcholu stonku, se liší i růstové regulátory v explantátech. Hladina růstového hormonu v explantátech vykazuje rozdílné reakce in vitro.

4. V případě explantátů se jedná o rozdílnou hladinu růstového hormonu. Kvalita zdrojové rostliny

Zdravotní stav rostliny je zásadním faktorem, který je třeba zvážit před získáním explantátu. Výzkumníci doporučují odebírat explantáty ze zdravých rostlin v porovnání s rostlinou, která je ve výživovém nebo vodním stresu nebo vykazuje příznaky onemocnění.

5. Účel tkáňové kultury

Před výběrem explantátu pro kulturu byste měli zvážit, jakou hodnotu chcete z kultury získat. V závislosti na požadované odezvě se výběr explantátů liší. Například pro klonální množení bude vhodným explantátem boční nebo terminální výhonek či pupen; pro indukci kalusu se obvykle používají kousky listenu, hypokotylu, stonku, listu nebo embrya. Pro produkci haploidů se kultivuje prašník nebo pyl.

6. Genotyp rostlin

Všechny druhy rostlin nereagují v tkáňové kultuře stejně. Mezi různými genotypy, druhy nebo kultivary existují velké rozdíly, takže některé se pěstují snadno a některé nereagují nebo jsou nepoddajné.

Nakupujte naše přípravky na ochranu rostlin ještě dnes!

1. Smith, R. H. (2013). Příprava explantátů. Plant Tissue Culture, 45-51. doi:10.1016/b978-0-12-415920-4.00004-9
2. Kubota, C. (2001). Koncepce a pozadí fotoautotrofního mikropropagace. Molecular Breeding of Woody Plants, Proceedings of the International Wood Biotechnology Symposium (IWBS), 325-334. doi:10.1016/s0921-0423(01)80089-7
3. https://en.wikipedia.org/wiki/Plant_tissue_culture…

.