La característica más ventajosa del cultivo de tejidos es la capacidad de utilizar «cualquier trozo de tejido de cualquier parte de la planta» para cultivar otra planta. Otras ventajas son la producción de un gran número de plantas en un periodo de tiempo más corto en comparación con las técnicas convencionales, la producción de plantas libres de enfermedades, etc.
El trozo de tejido vegetal que se coloca en el medio de cultivo se denomina explante. Aunque se sabe que cualquier tejido vegetal puede utilizarse para cultivar la planta completa, se aplican algunas condiciones. Sólo hay un tipo de tejido vegetal que no es adecuado para hacer crecer todas las especies de plantas en el cultivo de tejidos. Algunos factores determinan qué explante será adecuado para su cultura; eligiendo cuidadosamente los explantes sanos para su cultura, puede aumentar la productividad de la cultura múltiples veces.
Este artículo explica qué tipo de explantes se utilizan en el cultivo de tejidos y los factores deben ser considerados al elegir los explantes.
Tipos de explantes utilizados en el cultivo de tejidos
Todas las partes de las plantas pueden utilizarse como explantes para el cultivo de tejidos: hojas, tallos, una porción de brotes, flores, anteras, ovario, células individuales indiferenciadas o tejidos maduros. Sin embargo, las células deben ser capaces de desdiferenciarse y reanudar la división celular y tener citoplasma.
Algunas partes, como la punta de la raíz, rara vez se utilizan como explantes para procesos de cultivo de tejidos. Las puntas de las raíces son difíciles de aislar y contienen microbios en sus tejidos, formando una fuerte asociación con ellos. Además, a las raíces se adhieren partículas de tierra que son difíciles de eliminar sin dañar algunos tejidos.
Factores a tener en cuenta al elegir los explantes
1. Edad del órgano utilizado para obtener el explante
La edad del explante es un factor importante a la hora de elegir el explante adecuado. Los investigadores aconsejan utilizar partes jóvenes como fuente de tejido para el cultivo porque los tejidos más jóvenes se correlacionan con mejores respuestas fisiológicas en la investigación de laboratorio. Dado que los tejidos jóvenes son recién generados, se adaptan mejor al duro proceso de esterilización superficial. La esterilización superficial es un proceso que puede dañar potencialmente el tejido y ayuda a establecer cultivos limpios.
2. Cuándo se recogió el explante
La estación en la que se recoge el explante influye en su contaminación y en la respuesta de crecimiento en el cultivo. Diferentes estaciones tienen diferentes efectos sobre los explantes. Por ejemplo, los explantes (como las yemas o los brotes) recogidos durante la primavera (mientras están en su estado de florecimiento) son más sensibles en comparación con los explantes recogidos durante la temporada de invierno (mientras están en su estado de letargo).
Los explantes en estado de reposo generalmente no responden en el cultivo, lo que significa que deben someterse a varios tratamientos químicos para que respondan a los procesos de cultivo de tejidos. Además, las posibilidades de contaminación también aumentan hacia la época invernal.
3. Tamaño y lugar del explante
Los explantes más pequeños son difíciles de cultivar y son menos receptivos que los de mayor tamaño. Los trozos de tejido más grandes contienen suficientes reservas de nutrientes y reguladores del crecimiento vegetal para estimular su crecimiento en los cultivos. Los explantes más pequeños requieren componentes adicionales para mantener el cultivo.
El otro factor que decide la salud de los cultivos es la fuente de extracción de la planta. Por ejemplo, un informe publicado por Tran Thah Van (1977) muestra que dependiendo de si los explantes se toman de la base, del medio o de la parte superior del tallo, los reguladores del crecimiento en los explantes también varían. El nivel de hormonas de crecimiento de los explantes muestra diferentes respuestas in vitro.
4. Calidad de la planta fuente
La salud de la planta es un factor esencial a tener en cuenta antes de obtener el explante. Los investigadores aconsejan tomar explantes de las plantas sanas en comparación con las plantas sometidas a estrés nutricional o hídrico o que muestren algún síntoma de enfermedad.
5.Propósito del cultivo de tejidos
Antes de elegir el explante para su cultivo, debe considerar qué valor desea recibir del mismo. Dependiendo de la respuesta deseada, la elección de los explantes varía. Por ejemplo, para la propagación clonal, el explante adecuado será un brote de yema lateral o terminal o un brote; para la inducción de callo, se suelen utilizar trozos de cotiledón, hipocótilo, tallo, hoja o embrión. Para la producción de haploides, se cultivan anteras o polen.
6. Genotipo de la planta
No todas las especies de las plantas responden por igual en el cultivo de tejidos. Existen grandes diferencias entre los distintos genotipos, especies o cultivares, lo que hace que algunos se cultiven fácilmente y otros no respondan o sean recalcitrantes.
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- Smith, R. H. (2013). Explant Preparation. Plant Tissue Culture, 45-51. doi:10.1016/b978-0-12-415920-4.00004-9
- Kubota, C. (2001). Conceptos y antecedentes de la micropropagación fotoautotrófica. Molecular Breeding of Woody Plants, Proceedings of the International Wood Biotechnology Symposium (IWBS), 325-334. doi:10.1016/s0921-0423(01)80089-7
- https://en.wikipedia.org/wiki/Plant_tissue_culture…
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