La caratteristica più vantaggiosa della coltura di tessuti è la capacità di utilizzare “qualsiasi pezzo di tessuto da qualsiasi parte della pianta” per far crescere un’altra pianta. Altri vantaggi includono la produzione di un gran numero di piante in un tempo più breve rispetto alle tecniche convenzionali, la produzione di piante senza malattie, ecc.
Il pezzo di tessuto vegetale che viene posto sul terreno di crescita è chiamato espianto. Anche se è noto che qualsiasi tessuto vegetale può essere utilizzato per far crescere l’intera pianta, ci sono alcune condizioni applicate! C’è solo un tipo di tessuto vegetale che non è adatto a far crescere tutte le specie di piante in coltura di tessuti. Alcuni fattori determinano quale espianto sarà adatto per la tua cultura; scegliendo attentamente gli espianti sani per la tua cultura, puoi aumentare la produttività della cultura in modo multiplo.
Questo articolo spiega che tipo di espianti sono usati nella cultura dei tessuti e i fattori che dovrebbero essere considerati mentre scegli gli espianti.
Tipi di espianti usati nella coltura dei tessuti
Tutte le parti delle piante possono essere usate come espianti per la coltura dei tessuti: foglie, steli, una porzione di germogli, fiori, antere, ovari, singole cellule indifferenziate o tessuti maturi. Tuttavia, le cellule devono essere in grado di de-differenziarsi e riprendere la divisione cellulare e avere citoplasma.
Alcune parti, come la punta della radice, sono raramente usate come espianti per i processi di coltura dei tessuti. Le punte delle radici sono difficili da isolare e contengono microbi nei loro tessuti, formando una forte associazione con essi. Inoltre, le particelle di terreno sono attaccate alle radici e sono difficili da rimuovere senza danneggiare alcuni tessuti.
Fattori da considerare nella scelta degli espianti
1. Età dell’organo usato per ottenere l’espianto
L’età dell’espianto è un fattore importante nella scelta dell’espianto giusto. I ricercatori consigliano di usare parti giovani come fonte di tessuto per la coltura perché i tessuti più giovani sono correlati a migliori risposte fisiologiche nella ricerca di laboratorio. Dal momento che i tessuti giovani sono appena generati, sono più adatti al ruvido processo di sterilizzazione superficiale. La sterilizzazione superficiale è un processo che può potenzialmente danneggiare i tessuti e aiuta a stabilire culture pulite.
2. Quando l’espianto è stato raccolto
La stagione in cui l’espianto è stato raccolto influisce sulla sua contaminazione e sulla risposta di crescita in coltura. Stagioni diverse hanno effetti diversi sugli espianti. Per esempio, gli espianti (come le gemme o i germogli) raccolti durante la primavera (mentre sono in fase di fioritura) sono più reattivi rispetto agli espianti raccolti durante la stagione invernale (mentre sono in stato di quiescenza).
Gli espianti dormienti sono generalmente poco reattivi in coltura, il che significa che devono subire diversi trattamenti chimici per renderli reattivi ai processi di coltura dei tessuti. Inoltre, le possibilità di contaminazione aumentano anche verso l’inverno.
3. Dimensione e posto dell’espianto
Gli espianti più piccoli sono difficili da coltivare e sono meno reattivi degli espianti di dimensioni maggiori. I pezzi di tessuto più grandi contengono abbastanza riserve di nutrienti e regolatori della crescita delle piante per stimolare la loro crescita in coltura. Gli espianti più piccoli richiedono componenti aggiuntivi per sostenere la cultura.
L’altro fattore che decide la salute delle culture è la fonte di estrazione dalla pianta. Per esempio, un rapporto pubblicato da Tran Thah Van (1977) mostra che a seconda che gli espianti siano presi dalla base, dalla metà o dalla cima del fusto, variano anche i regolatori di crescita negli espianti. Il livello di ormone della crescita degli espianti mostra diverse risposte in vitro.
4. Qualità della pianta di partenza
La salute della pianta è un fattore essenziale da considerare prima di ottenere l’espianto. I ricercatori consigliano di prendere gli espianti dalle piante sane rispetto alle piante sotto stress nutrizionale o idrico o che mostrano sintomi di malattia.
5.Scopo della coltura di tessuti
Prima di scegliere l’espianto per la vostra cultura, dovreste considerare quale valore volete ricevere dalla cultura. A seconda della risposta desiderata, la scelta degli espianti varia. Per esempio, per la propagazione clonale, l’espianto adatto sarà un germoglio o un germoglio di gemma laterale o terminale; per l’induzione del callo, di solito si usano pezzi di cotiledone, ipocotile, fusto, foglia o embrione. Per la produzione aploide, si coltiva l’antera o il polline.
6. Genotipo della pianta
Tutte le specie di piante non rispondono allo stesso modo nella coltura dei tessuti. Esistono grandi differenze tra i diversi genotipi, specie o cultivar, rendendo alcuni facilmente coltivabili e altri non reattivi o recalcitranti.
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- Smith, R. H. (2013). Preparazione degli espianti. Plant Tissue Culture, 45-51. doi:10.1016/b978-0-12-415920-4.00004-9
- Kubota, C. (2001). Concetti e sfondo della micropropagazione fotoautotrofica. Molecular Breeding of Woody Plants, Proceedings of the International Wood Biotechnology Symposium (IWBS), 325-334. doi:10.1016/s0921-0423(01)80089-7
- https://en.wikipedia.org/wiki/Plant_tissue_culture…
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