Use of SDS to Extract Sorghum and Maize Proteins for Free Zone Capillary Electrophoresis (FZCE) Analysis†

Two different extraction methods for extracting sorghum (Sorghum bicolor L. Moench.) storage proteins for free zone capillary electrophoresis (FZCE) analysis were compared. Egy hagyományos, 60%-os t-butanol alapú oldószert hasonlítottunk össze egy anionos detergens SDS-t tartalmazó pH 10-es bórapufferrel, amelyet a nem-kafirinek 60%-os t-butanolos kicsapása követett. A kétféle kivonat FZCE-elemzése azonos mintázatot mutatott, annak ellenére, hogy az SDS-nek minden fehérjének azonos töltés-tömeg arányt kellett volna adnia. Ezt a módszert sikeresen alkalmazták kukoricafehérjékre is. A t-butanol használata a nem-kafirinek kicsapásához, alacsony pH-n végzett elektroforézissel kombinálva, feltehetően eltávolította az SDS-t a tárolófehérjékből. Az SDS extrakciós eljárás stabilabb kivonatokat eredményezett az FZCE elemzéshez. Ezek a kivonatok közvetlenül is felhasználhatók voltak SDS-kapilláris elektroforézis (SDS-CE) elválasztásokhoz. A 15 genotípusból származó kafirineket ezzel az eljárással extrahálták, és FZCE-vel és SDS-CE-vel elemezték. A kafirinek FZCE-vel történő felbontása sokkal nagyobb volt, mint az SDS-CE-vel, ami azt mutatja, hogy a kafirin fehérjék nagyfokú töltéssűrűség-variabilitással rendelkeztek egy viszonylag kis molekulaméretű eloszláson belül. Az FZCE elektropherogramokon az α-kafirineknek két különböző csoportja volt látható.

Vélemény, hozzászólás?

Az e-mail-címet nem tesszük közzé.