Abstract

Az iszkémiás hipertóniás betegek hidroklorotiaziddal történő kezelése szívritmuszavarokat válthat ki. Jelen vizsgálatban a zöld tea önmagában és a hidroklorotiazid hatásának diuretikus potenciálját vizsgáltuk interaktív csoportokban. Patkányokat magas (500 mg/kg, p.o.) és alacsony (100 mg/kg, p.o.) dózisú zöldtea-kivonattal kezeltünk 30 napon keresztül önmagában és interaktív csoportokban. A standard, a magas és az alacsony dózisú interaktív csoportok hidroklorotiazidot (10 mg/kg, p.o.) kaptak a kísérlet napján. A különböző kezelések hatását a diuretikus hatás, a vizelethajtó aktivitás, a kiválasztódott sóterhelés százalékos aránya, valamint a vizelet nátrium- és káliumszintjének értékelésével vizsgálták. A zöld tea mind magas, mind alacsony dózisban jelentős diuretikus potenciált mutatott, és hidroklorotiaziddal kombinálva jelentős javulást eredményezett az aktivitásban a csak hidroklorotiaziddal kezelt csoporthoz képest. Megállapítható, hogy a zöld tea kivonat hidroklorotiaziddal kombinálva jelentős növekedést mutatott a diuretikus aktivitásban. A jelen vizsgálat legfontosabb megfigyelése, hogy bár a kombináció növeli a diuretikus potenciált, mégis felelős a vizelet káliumveszteségének csökkenéséért.

1. Bevezetés

A vízkiválasztást serkentő diuretikus vegyületek potenciálisan hasznosak a legtöbb betegségben, beleértve az ödémát mutató betegségeket is, mint például a pangásos szívelégtelenség, a nefritisz, a terhességi toxémia, a premenstruációs feszültség és a magas vérnyomás. A jelenleg rendelkezésre álló diuretikumok, mint például a tiazidok és a hurokdiuretikumok különböző káros hatásokat mutatnak, például elektrolitegyensúlyzavart és anyagcsere-változásokat. A diuretikumok egy része gyógynövényekből származik, és az ayurvédikus gyógyászati rendszerben említett számos gyógynövényről ismert, hogy diuretikus tulajdonságokkal rendelkezik, mint például az Abelmoschus esculentus, Bacopa monnieri, Barbara vulgaris és Cissampelos pareira .

A diuretikumok, különösen a hidroklorotiazid (HCTZ), szoros megfigyelés alatt állnak az ischaemiás szívbetegségben szenvedő betegek magas vérnyomásának kezelésében. A tiazidok a vizelet káliumveszteségének növekedése révén felelősek a hipokalémia kialakulásáért . Dokumentálták, hogy még az enyhe vagy mérsékelt hypokalaemia is növeli a morbiditás és a mortalitás kockázatát a kardiovaszkuláris betegségben szenvedő betegeknél . Mostanra több tanulmány is bizonyította, hogy a diuretikumok által kiváltott hipokalémia esetén a kamrai ektópiás aktivitás jelentős gyakorisága felelős a hirtelen halálért . A tiazidokkal összefüggő plazma káliumszint mellett a renin-angiotenzin-aldoszteron rendszer aktiválása és különösen a mineralokortikoid receptorok stimulálása kulcsfontosságú meghatározó tényezők a gyulladásos folyamatban és a szív- és érrendszeri betegségek progressziójában .

A zöld tea az egyik legtöbbet fogyasztott ital a világon . A Theaceae családba tartozó Camellia sinensis nem fermentált leveleiből nyerik, amely több katechint tartalmaz, mint a fekete tea vagy az oolong tea. A magas katechintartalom miatt bizonyos ásványi anyagok és vitaminok növelik az ilyen típusú tea antioxidáns potenciálját. A zöld teát a hagyományos kínai orvoslás ősidők óta egészséges italnak tekinti. A legújabb tanulmányok arról számoltak be, hogy a zöld tea hozzájárulhat a szív- és érrendszeri betegségek és a rák egyes formáinak kockázatának csökkentéséhez, valamint a száj egészségének elősegítéséhez. Antibakteriális, antivirális, neuroprotektív és antifibrotikus tulajdonságokkal rendelkezik. A jelentések szerint a zöld tea védelmet nyújt a nap ultraibolya sugarai ellen és növeli a csontok ásványi sűrűségét.

Mostanáig nem végeztek olyan vizsgálatot, amely a zöld tea vizelethajtó hatását bizonyította volna. A Srí Lanka-i fekete tea forró vizes infúziójának potenciális vizelethajtó hatásáról számoltak be, és a koffein jelenlétét a hatás fő kulcskomponenseként jelölték meg .

A jelen vizsgálatot tehát úgy tervezték, hogy értékeljék a zöld tea önmagában és hidroklorotiaziddal kombinálva diuretikus hatását.

2. Anyagok és módszerek

2.1. A zöld tea hatása a vizelethajtó hatásra. Vegyszerek

Minden felhasznált vegyszer analitikai minőségű volt, és szabványos cégektől vásárolták. A hidroklorotiazid tiszta mintáját a Bangalore Test House (Bangalore, India) ajándékozta. A biokémiai készleteket a Crest Biosystems (Goa, India) cégtől szereztük be.

2.2. Bioanalitikai készletek Kísérleti állatok

Egészséges, felnőtt, 175-250 g súlyú, négyhetes, mindkét nemű Wistar albínó patkányokat a Shree Devi College of Pharmacy, Mangalore állatházából szereztük be. A patkányokat polipropilén ketrecekben tartották, és standardizált körülmények között (12 óra L: D ciklus, 25° ± 5°C), paddy-héj alommal a Shree Devi College of Pharmacy, Mangalore központi állatházában tartották. Az állatok standard pellet eledelt kaptak, és szabadon hozzáférhettek a tisztított ivóvízhez. Az Állatkísérletek Ellenőrzésének és Felügyeletének Bizottsága (CPCSEA), az Indiai Kormány Társadalmi Igazságosság és Jogosultság Minisztériumának iránymutatásait követték, és a vizsgálat elvégzéséhez előzetes engedélyt kértek az Intézményi Állat Etikai Bizottságtól (SDCP/IAEC-19/2012-13).

2.3. Az állatokkal végzett kísérletek ellenőrzése és felügyelete. Növényi anyagok

A zöld tea (Camellia sinensis) leveleit 2013 júniusában vásároltuk Mangalore helyi piacáról, amely a GREEN TEA márkanevet viseli (gyártó: New hilltop traders, Vandiperiyar, Kerala). A hitelesítést Dr. Neoline J. Pinto, H.O.D., Botanikai Tanszék, St. Agnes College, Mangalore (SAC/MNG/SMP/Drug/2013-06/52) végezte. A leveleket kalapácsmalomban őrölték, és 1 mm-es szitán átszitálták. Száz gramm levelet 1 liter desztillált vízzel 10 percig 70°C-on főztünk. A felmelegített oldatot leszűrtük, vákuumban bepároltuk és fagyasztva szárítottuk, hogy sűrű gumiszerű masszát kapjunk . A hozam 24,76% (W/W) volt.

2.4. A kivonat fitokémiai becslései

A zöld tea vizes kivonatát minőségi elemzésnek vetettük alá a következő szerves növényi összetevőkre vonatkozóan: alkaloidok, fehérjék aminosavak, antrakinonok, flavonoidok, szénhidrátok, szaponinok, tanninok, szteroidok, triterpenoidok és szívglikozidok (1. táblázat).

2.5. Akut toxicitási vizsgálat

Az akut toxicitási vizsgálatot az OPPTS (Office of Prevention, Pesticide and Toxic Substance) irányelvek szerint végeztük a határérték vizsgálati eljárást követve .

A vizsgálatokat megelőzően az egereket egy éjszakán át éheztették, majd két, egyenként háromfős csoportra osztották. A 2 g/testsúlykilogramm és 5 g/testsúlykilogramm vizsgálati dózist szájon át adták be az egerek bármelyik csoportjának, majd 72 órán keresztül megfigyelték az elhullást. A maximális biztonságos dózis 1/10-ed részét és 1/50-ed részét, amely 500 és 100 mg/kg orális adagnak felel meg, választották ki magas, illetve alacsony dózisnak.

2.6. Kísérleti protokoll

A macskákat a következő hat, egyenként nyolc állatból álló csoportra osztottuk: I. csoport: vivőanyag (1 ml/kg, p.o. 30 napig), II. csoport: hidroklorotiazid (HCTZ) 10 mg/kg a kísérlet napján, p.o., III. csoport: zöld tea kivonat (GTE) 100 mg/kg 30 napig, p.o., IV. csoport: zöld tea kivonat (GTE) 500 mg/kg 30 napig, p.o., V. csoport: zöld tea kivonat (GTE) 100 mg/kg 30 napig + HCTZ, VI. csoport: zöld tea kivonat (GTE) 500 mg/kg 30 napig + HCTZ.

A profilaktikusan kezelt állatokat egy éjszakán át koplaltatták, és ad libitum vizet kaptak. Másnap reggel a patkányok szájon át 25 ml/kg normál sóoldatot kaptak, és közvetlenül a normál sóoldat beadása után a patkányokat egyenként egy módosított, dróthálóval ellátott tölcsérbe helyezték, amelybe egy beosztásos kémcsövet helyeztek. A HCTZ-t tartalmazó csoportokban a HCTZ-t szájon át adták be finom homogenizált szuszpenzió formájában, 25 ml/kg normál sóoldatban. A következő 5 óra alatt ürített vizeletet összegyűjtöttük, és az egyes patkányok teljes vizeletmennyiségét összehasonlítottuk a normál sóoldat beadása után keletkezett vizelet mennyiségével. A csoport minden egyes állatának 5 óra alatt ürített vizeletmennyiségét a beadott folyadék (normál sóoldat) százalékában fejeztük ki. Ez a százalékos arány az állat súlyától független mérőszámot ad a vizeletkiválasztásra. A vizsgált csoport vizeletkiválasztásának és a kontrollcsoport vizeletkiválasztásának hányadosa a diuretikus hatás mérésére szolgál a gyógyszer adott dózisára. Mivel a diuretikus hatás hajlamos a változékonyságra, ehelyett a diuretikus aktivitás néven ismert paramétert számították ki. A diuretikus aktivitás meghatározásához a vizsgálati csoportok (zöldtea-kivonat) diuretikus hatását a standard (HCTZ) diuretikus hatásával hasonlították össze.

A kiválasztódott sóterhelés százalékos aránya = a vizelet mennyisége/a sóterhelés mennyisége × 100.

Húgyúti kiválasztás = a teljes vizeletkibocsátás/az összes beadott folyadék × 100.

Diuretikus hatás = a kezelt csoport vizeletkiválasztása/kontrollcsoport vizeletkiválasztása.

Diuretikus aktivitás = a vizsgált gyógyszer vizelethajtó hatása/szabványos gyógyszer vizelethajtó hatása.

A vizelet Na+ és K+ tartalmát automatikus analizátorral elemeztük.

2.7. A vizeletkiválasztás és a vizelettartalom meghatározása. Statisztikai elemzés

Az eredményeket átlag +/- SEM-ben fejeztük ki. A statisztikai szignifikanciát egyirányú varianciaanalízissel (ANOVA), majd Tukey-Kramer többszörös összehasonlító teszttel értékeltük. szignifikánsnak tekintettük.

3. Eredmények

3.1. Az eredmények

3. Előzetes fitokémiai vizsgálat

A zöld tea vizes kivonatának előzetes fitokémiai vizsgálata kimutatta alkaloidok, flavonoidok, szteroidok, tanninok, fehérjék, aminosavak, szénhidrátok, redukáló cukor és dezoxiszugárok jelenlétét, és jelezte a terpenoidok, szaponinok, glikozidok és antrakinonok hiányát. A GTE százalékos hozamát 24,76%-nak találták.

3.2. Hatás a vizeletben történő elektrolitkiválasztásra

3.2.1. Hatás a nátriumion-koncentrációra a vizeletben

Szignifikáns növekedést értünk el a Na+ ion kiválasztásában a vizeletben a normál kontrollhoz képest minden kezelésnél, a HCTZ önmagában (, ) vagy a GTE-vel együttesen ( és , , a GTE100 + HCTZ és a GTE-500 + HCTZ esetében a maximális kiválasztást idézte elő.).

A GTE-100 + HCTZ szignifikáns () növekedést mutatott, de a GTE-500 + HCTZ esetében szignifikáns () növekedés volt a Na+ ionkoncentrációban az egyedül HCTZ-vel kezelt csoporthoz képest (2. táblázat) (1. ábra).

1. ábra

Effekt a vizeletben történő elektrolitkiválasztásra. Minden érték átlag ± SEM, , , a normál kontrollhoz képest; , a hidroklorotiazidhoz képest. GTE-100 (zöld tea kivonat, 100 mg/kg), GTE-500 (zöld tea kivonat, 500 mg/kg) és HCTZ (hidroklorotiazid, 10 mg/kg).

3.2.2. Hatás a káliumion-koncentrációra a vizeletben

A HCTZ-vel kezelt csoportban szignifikáns () növekedést mutatott a K+ koncentráció a vizeletben a normál kontrollhoz képest.

A GTE-100 + HCTZ szignifikáns (), míg a GTE-500 + HCTZ esetében a HCTZ csoporthoz képest szignifikáns () csökkenést tapasztaltunk a K+ koncentrációban a vizeletben (2. táblázat) (1. ábra).

3.2.3. Hatás a sótartalom százalékos kiválasztására és a vizelethajtó hatásra

Minden kezelés szignifikáns növekedést mutatott a sótartalom százalékos kiválasztásában a normál kontrollhoz képest.

A GTE-500 + HCTZ kezelt csoport felelős a sótartalom százalékos kiválasztásának és a vizelethajtó hatás jelentős () növekedéséért a HCTZ egyedül kezelt csoporthoz képest (3. táblázat).

3.2.4. táblázat. Hatás a diuretikus aktivitásra

A diuretikus aktivitás a GTE-100 és a GTE-500 esetében 0,60 és 0,75, míg a GTE-100 + HCTZ és a GTE-500 + HCTZ esetében 1,08 és 1,75 volt.28 volt (2. táblázat).

4. Megbeszélés

A jelen tanulmány célja az volt, hogy megvizsgálja a zöld tea önmagában és hidroklorotiaziddal (HCTZ) kombinációban kifejtett diuretikus hatását. A megfigyelt eredmények arra utaltak, hogy a GTE (100 és 500 mg/kg, p.o.) mindkét dózisban jelentős diuretikus aktivitást mutatott. További eredmények azt sugallták, hogy a zöld tea HCTZ-vel kombinálva jelentős növekedést mutatott a diuretikus potenciálban, de a vizelet K+-szintje jelentősen csökkent a csak HCTZ-vel kezelt csoporthoz képest.

A HCTZ diuretikus hatása a Na+/Cl- szimporter (kotranszporter) rendszer gátlásával függ össze a disztális konvolutált tubulusban, a Cl- kötőhelyekért való versengés révén, és a Na+ reabszorpció gátlásával a Na+ kiválasztásának növekedésével, ezáltal a vizeletürítés növekedésével. Közvetett módon a HCTZ diuretikus hatása csökkenti a plazma térfogatát, aminek következtében nő a vizelet káliumveszteség, a plazma renin aktivitása és az aldoszteron szekréció, valamint csökken a szérum kálium .

A jelen vizsgálatban a HCTZ a vizelet Na+ és K+ szintjének jelentős növekedését mutatta. A HCTZ a diuretikus hatás jelentős növekedését is kimutatta a normál kontrollhoz képest.

A GTE (100 és 500 mg/kg, p.o.), mind magas, mind alacsony dózisban, szintén jelentős növekedést mutatott a vizelet Na+ és diuretikus hatásában a kontrollhoz képest, jelentős vizelet K+ veszteség nélkül.

A zöld teában található fő flavanolok és purin alkaloidok felelősek az angiotenzin-konvertáló enzim (ACE) aktivitásának gátlásáért. A zöld tea vegyes gátló mechanizmussal gátolja az ACE aktivitását . Az ACE gátlás lehet az egyik fő oka a vizelethajtó hatásnak és a vizelet Na+ szintjének emelkedésének . Ettől eltekintve a zöld tea a szénsav anhidráz aktivitás gátlásáért is felelős. A zöld tea a vese véráramlás és a szív teljesítményének növekedése révén növeli a glomeruláris szűrési sebességet, ami hozzájárulhat a vizelethajtó hatáshoz. A jelen vizsgálat eredményei ezeket a tényeket a GTE diuretikus aktivitásának dózisfüggő módon történő jelentős növekedésével igazolják. A GTE HCTZ-vel kombinálva képes fokozott diuretikus hatékonyságot mutatni a csak HCTZ-vel kezelt csoporthoz képest.

A GTE-vel járóACE gátlás az aldoszteron aktivitás csökkenését és a kálium visszatartás növekedését okozza . Ezzel összhangban az eredmények nem mutattak szignifikáns káliumveszteséget a GTE kezeléssel. A kombinált csoportokban a GTE is szignifikánsan csökkentette a káliumveszteséget a csak HCTZ-vel kezelt csoporthoz képest. A GTE gyulladáscsökkentő tulajdonsága is hozzájárulhat a diuretikus aktivitás kimutatásához .

A HCTZ-vel együtt kis és nagy dózisú GTE-vel kezelt csoportok a diuretikus potenciál jelentős növekedését mutatták a Na+ ion kiválasztás, a kiválasztott sóterhelés százalékos aránya, a diuretikus hatás és a diuretikus aktivitás paramétereinek növelésével. Érdekes módon a K+ veszteség a kombinációs csoportokban szignifikánsan csökkent a csak HCTZ-vel kezelt csoporthoz képest. Ez a megfigyelés nagyon fontos, mivel a zöld tea képes csökkenteni a HCTZ által kiváltott hipokalémiát. Továbbá a kombinációs csoportokban a GTE dózisfüggő módon növeli a HCTZ hatékonyságát.

5. Következtetés

A jelen vizsgálatból arra lehet következtetni, hogy a GTE HCTZ-vel kombinálva jelentősen növelte a diuretikus aktivitást. A jelen vizsgálat legfontosabb megfigyelése, hogy bár a kombináció növeli a diuretikus potenciált, felelős a vizelet káliumveszteségének csökkenéséért, ami csökkenti a hipokalémia esélyét. Ez a vizsgálat előnyösnek bizonyulhat az iszkémiás hipertóniás betegek számára, ahol a HCTZ dózisa csökkenthető, és lehetséges a kapcsolódó mellékhatások minimalizálása GTE jelenlétében.

Érdekütközés

A szerzők kijelentik, hogy nincs érdekellentét a cikk publikálásával kapcsolatban.

A szerzők kijelentik, hogy nincs érdekütközés a cikk publikálásával kapcsolatban.