Abstract

Le traitement des patients hypertendus ischémiques avec l’hydrochlorothiazide peut précipiter des arythmies cardiaques. La présente étude a été entreprise pour évaluer le potentiel diurétique du thé vert seul et ses effets sur l’hydrochlorothiazide dans des groupes interactifs. Des rats ont été traités avec des doses élevées (500 mg/kg, p.o.) et faibles (100 mg/kg, p.o.) d’extrait de thé vert dans des groupes seuls et interactifs pendant 30 jours. Les groupes interactifs à dose standard, élevée et faible ont reçu de l’hydrochlorothiazide (10 mg/kg, p.o.) le jour de l’expérience. L’effet des différents traitements a été évalué par l’évaluation de l’action diurétique, de l’activité diurétique, du pourcentage de charge saline excrétée, et des niveaux de sodium et de potassium dans l’urine. Le thé vert, à la fois à forte et à faible dose, a montré un potentiel diurétique significatif et lorsqu’il est associé à l’hydrochlorothiazide, il a entraîné une amélioration significative de l’activité par rapport au groupe traité avec l’hydrochlorothiazide seul. On peut conclure que l’extrait de thé vert combiné à l’hydrochlorothiazide a montré une augmentation significative de l’activité diurétique. L’observation la plus importante de la présente étude est que même si la combinaison augmente le potentiel diurétique, elle est responsable de la diminution de la perte de potassium urinaire.

1. Introduction

Les composés diurétiques qui stimulent l’excrétion de l’eau sont potentiellement utiles dans la plupart des troubles, y compris ceux présentant un œdème, comme l’insuffisance cardiaque congestive, la néphrite, la toxémie de la grossesse, la tension prémenstruelle et l’hypertension. Les diurétiques actuellement disponibles, tels que les thiazidiques et les diurétiques de l’anse, présentent divers effets indésirables, comme un déséquilibre électrolytique et des altérations métaboliques. Certains diurétiques sont dérivés de plantes médicinales et un grand nombre de plantes médicinales mentionnées dans le système de médecine ayurvédique sont connues pour posséder des propriétés diurétiques telles que Abelmoschus esculentus, Bacopa monnieri, Barbara vulgaris, et Cissampelos pareira .

Les diurétiques, en particulier l’hydrochlorothiazide (HCTZ), sont sous étroite surveillance dans la gestion de l’hypertension chez les patients atteints de cardiopathies ischémiques. Les thiazides sont responsables de la survenue d’une hypokaliémie par augmentation de la perte urinaire de potassium . Il a été documenté que même une hypokaliémie légère ou modérée augmente les risques de morbidité et de mortalité chez les patients atteints de maladies cardiovasculaires . Plusieurs études ont maintenant démontré qu’une incidence significative de l’activité ectopique ventriculaire avec l’hypokaliémie induite par les diurétiques est responsable de la mort subite . Outre les niveaux de potassium plasmatique associés aux thiazides, l’activation du système rénine-angiotensine-aldostérone et, en particulier, la stimulation des récepteurs minéralocorticoïdes sont des déterminants clés du processus inflammatoire et de la progression des maladies cardiovasculaires .

Le thé vert est l’une des boissons les plus consommées au monde. Il est obtenu à partir des feuilles non fermentées de Camellia sinensis appartenant à la famille Theaceae, qui contient plus de catéchines que le thé noir ou le thé oolong. En raison de la présence de niveaux élevés de catéchines, certains minéraux et vitamines augmentent le potentiel antioxydant de ce type de thé. Depuis les temps anciens, le thé vert est considéré comme une boisson saine par la médecine traditionnelle chinoise. Des études récentes ont rapporté que le thé vert peut contribuer à la réduction du risque de maladies cardiovasculaires et de certaines formes de cancer, ainsi qu’à la promotion de la santé bucco-dentaire. Il possède des propriétés antibactériennes, antivirales, neuroprotectrices et antifibrotiques. Il est rapporté que le thé vert donne une protection contre les rayons ultraviolets solaires et augmente la densité minérale osseuse .

Jusqu’à présent, aucune étude n’a été menée pour démontrer l’effet diurétique du thé vert. L’infusion d’eau chaude de thé noir sri-lankais a été rapportée pour avoir une activité diurétique potentielle et la présence de caféine a été déclarée comme principal composant clé pour l’activité .

Donc la présente étude a été conçue pour évaluer l’effet du thé vert seul et en combinaison avec l’hydrochlorothiazide sur l’activité diurétique.

2. Matériaux et méthodes

2.1. Produits chimiques

Tous les produits chimiques utilisés étaient de qualité analytique et achetés auprès de sociétés standard. Un échantillon pur d’hydrochlorothiazide a été donné par Bangalore Test House (Bangalore, Inde). Les kits biochimiques ont été fournis par Crest Biosystems (Goa, Inde).

2.2. Animaux expérimentaux

Des rats albinos Wistar adultes en bonne santé de l’un ou l’autre sexe pesant 175-250 g, âgés de quatre semaines, ont été obtenus de l’Animal House, Shree Devi College of Pharmacy, Mangalore. Les rats ont été logés dans des cages en polypropylène et maintenus dans des conditions standardisées (cycles 12 h L : D, 25° ± 5°C) avec une litière de balle de riz à l’animalerie centrale, Shree Devi College of Pharmacy, Mangalore. Les animaux ont reçu une nourriture standard sous forme de granulés et ont eu un accès libre à de l’eau potable purifiée. Les directives du Comité pour le but de contrôle et de supervision des expériences sur les animaux (CPCSEA), ministère de la Justice sociale et de l’autonomisation, gouvernement de l’Inde, ont été suivies et une autorisation préalable a été demandée au Comité institutionnel d’éthique animale pour la réalisation de l’étude (SDCP/IAEC-19/2012-13).

2.3. Matériaux végétaux

Les feuilles de thé vert (Camellia sinensis) ont été achetées au mois de juin 2013, sur le marché local de Mangalore portant le nom de marque GREEN TEA (fabriqué par New hilltop traders, Vandiperiyar, Kerala). L’authentification a été faite par Dr. Neoline J. Pinto, H.O.D., Département de Botanique, St. Agnes College, Mangalore (SAC/MNG/SMP/Drug/2013-06/52). Les feuilles ont été broyées avec un moulin à marteaux et passées à travers un tamis de 1 mm de maille. Cent grammes de feuilles ont été bouillis avec 1 litre d’eau distillée pendant 10 min à 70°C. La solution chauffée a été filtrée, évaporée sous vide et lyophilisée pour obtenir une masse gommeuse épaisse. Le rendement a été trouvé à 24,76% (W/W).

2.4. Estimations phytochimiques de l’extrait

L’extrait aqueux de thé vert a été soumis à une analyse qualitative des constituants organiques végétaux suivants : alcaloïdes, protéines acides aminés, anthraquinones, flavonoïdes, glucides, saponines, tanins, stéroïdes, triterpénoïdes et glycosides cardiaques (tableau 1).

2.5. Étude de toxicité aiguë

Une étude de toxicité aiguë a été réalisée selon les directives de l’OPPTS (Office of Prevention, Pesticide and Toxic Substance) en suivant la procédure de test limite .

Les souris ont été mises à jeun toute la nuit avant les études, puis divisées en deux groupes de trois chacune. La dose d’essai de 2 g/kg de poids corporel et de 5 g/kg de poids corporel a été administrée par voie orale à l’un ou l’autre groupe de souris et ensuite observée pendant 72 heures pour la mortalité. 1/10e et 1/50e de la dose maximale sûre correspondant à 500 et 100 mg/kg par voie orale ont été sélectionnés comme doses élevées et faibles, respectivement.

2.6. Protocole expérimental

Les rats ont été répartis dans les six groupes suivants composés de huit animaux chacun : Groupe I : véhicule (1 mL/kg, p.o. pendant 30 jours), Groupe II : hydrochlorothiazide (HCTZ) 10 mg/kg le jour de l’expérience, p.o., Groupe III : extrait de thé vert (GTE) 100 mg/kg pendant 30 jours, p.o., Groupe IV : extrait de thé vert (GTE) 500 mg/kg pendant 30 jours, p.o., Groupe V : extrait de thé vert (ETG) 100 mg/kg pendant 30 jours + HCTZ, Groupe VI : extrait de thé vert (ETG) 500 mg/kg pendant 30 jours + HCTZ.

Les animaux traités par prophylaxie ont été mis à jeun pendant la nuit avec de l’eau autorisée ad libitum. Le lendemain matin, les rats ont reçu par voie orale 25 ml/kg de solution saline normale et, immédiatement après l’administration de la solution saline normale, les rats ont été placés individuellement dans un entonnoir modifié comportant un treillis métallique et équipé d’un tube à essai gradué. Dans les groupes ayant reçu de l’HCTZ, l’HCTZ a été administré par voie orale sous forme d’une fine suspension homogénéisée dans un volume de 25 mL/kg de solution saline normale. L’urine excrétée pendant les 5 heures suivantes a été recueillie et le volume total d’urine pour chaque rat a été comparé au volume d’urine produit après l’administration de solution saline normale. Le volume d’urine excrété pendant 5 h pour chaque animal du groupe est exprimé en pourcentage du liquide (solution saline normale) administré. Ce pourcentage donne une mesure de l’excrétion urinaire indépendante du poids de l’animal. Le rapport entre l’excrétion urinaire du groupe testé et l’excrétion urinaire du groupe témoin est utilisé comme mesure de l’action diurétique pour une dose donnée du médicament. Comme l’action diurétique est sujette à la variabilité, un paramètre connu sous le nom d’activité diurétique a été calculé à la place. Pour obtenir l’activité diurétique, l’action diurétique des groupes testés (extrait de thé vert) a été comparée à celle de la norme (HCTZ).

Pourcentage de charge saline excrétée = volume d’urine/volume de charge saline × 100.

Excrétion urinaire = débit urinaire total/liquide total administré × 100.

Action diurétique = excrétion urinaire du groupe traité/excrétion urinaire du groupe témoin.

Activité diurétique = action diurétique du médicament testé/action diurétique du médicament standard.

Les teneurs urinaires en Na+ et K+ ont été analysées par auto-analyseur .

2.7. Analyse statistique

Les résultats sont exprimés en moyenne +/- SEM. La signification statistique a été évaluée à l’aide d’une analyse de variance à sens unique (ANOVA) suivie de tests de comparaison multiple Tukey-Kramer. a été considérée comme significative.

3. Résultats

3.1. Investigation phytochimique préliminaire

L’investigation phytochimique préliminaire de l’extrait aqueux du thé vert a montré la présence d’alcaloïdes, de flavonoïdes, de stéroïdes, de tanins, de protéines, d’acides aminés, de glucides, de sucre réducteur et de désoxysucres et a indiqué l’absence de terpénoïdes, de saponines, de glycosides et d’anthraquinones. Le rendement en pourcentage de GTE a été trouvé à 24,76%.

3.2. Effet sur l’excrétion des électrolytes dans l’urine

3.2.1. Effet sur la concentration de l’ion sodium dans l’urine

Une augmentation significative de l’excrétion de l’ion Na+ dans l’urine par rapport au contrôle normal a été obtenue dans tous les traitements, l’HCTZ induisant l’excrétion maximale soit seul (, ) soit en association avec la GTE ( et , , pour GTE100 + HCTZ et GTE-500 + HCTZ, respectivement.).

GTE-100 + HCTZ a montré une augmentation significative () mais dans le cas de GTE-500 + HCTZ, il y avait une augmentation significative () de la concentration en ions Na+ par rapport au groupe traité par HCTZ seul (Tableau 2) (Figure 1).

Figure 1

Effet sur l’excrétion des électrolytes dans l’urine. Toutes les valeurs sont des moyennes ± SEM, , , par rapport au contrôle normal ; , par rapport à l’hydrochlorothiazide. GTE-100 (extrait de thé vert, 100 mg/kg), GTE-500 (extrait de thé vert, 500 mg/kg) et HCTZ (hydrochlorothiazide, 10 mg/kg).

3.2.2. Effet sur la concentration d’ions potassium dans l’urine

Le groupe traité par HCTZ a montré une augmentation significative () de la concentration de K+ dans l’urine par rapport au contrôle normal.

GTE-100 + HCTZ a montré une () significative alors que dans le cas de GTE-500 + HCTZ une diminution significative () de la concentration de K+ dans l’urine a été observée par rapport au groupe HCTZ (Tableau 2) (Figure 1).

3.2.3. Effet sur le pourcentage d’excrétion de la charge saline et l’action diurétique

Tous les traitements ont montré une augmentation significative du pourcentage d’excrétion de la charge saline par rapport au contrôle normal.

Le groupe traité par GTE-500 + HCTZ est responsable d’une augmentation significative () du pourcentage d’excrétion de la charge saline et de l’action diurétique par rapport au groupe traité par HCTZ seul (tableau 3).

3.2.4. Effet sur l’activité diurétique

L’activité diurétique pour GTE-100 et GTE-500 était de 0,60 et 0,75, respectivement, tandis que pour GTE-100 + HCTZ et GTE-500 + HCTZ, elle s’est avérée être de 1,08 et 1.28, respectivement (Tableau 2).

4. Discussion

Le but de la présente étude était d’étudier l’effet du thé vert seul et avec la combinaison de l’hydrochlorothiazide (HCTZ) sur l’activité diurétique. Les résultats observés ont suggéré que le GTE (100 et 500 mg/kg, p.o.) dans les deux doses a montré une activité diurétique significative. D’autres résultats ont suggéré que le thé vert, lorsqu’il est associé à l’HCTZ, a montré une augmentation significative du potentiel diurétique, mais la perte urinaire du niveau de K+ a été diminuée de manière significative par rapport au groupe traité par l’HCTZ seul.

L’action diurétique de l’HCTZ est associée à l’inhibition du système symporteur (cotransporteur) Na+/Cl- dans le tubule contourné distal, en entrant en compétition pour les sites de liaison du Cl-, et à l’augmentation de l’excrétion du Na+ en inhibant la réabsorption du Na+, augmentant ainsi le débit urinaire. Indirectement, l’action diurétique de l’HCTZ réduit le volume plasmatique, avec une augmentation conséquente de la perte de potassium urinaire, de l’activité rénine plasmatique et de la sécrétion d’aldostérone et une diminution du potassium sérique .

Dans cette présente étude, l’HCTZ a démontré une augmentation significative des taux urinaires de Na+ et de K+. L’HCTZ a également démontré une augmentation significative de l’action diurétique par rapport au contrôle normal.

L’ETG (100 et 500 mg/kg, p.o.), à des doses élevées et faibles, a également démontré une augmentation significative du Na+ urinaire et de l’activité diurétique par rapport au contrôle, sans perte significative de K+ urinaire.

Les principaux flavanols et alcaloïdes puriques présents dans le thé vert sont responsables de l’inhibition de l’activité de l’enzyme de conversion de l’angiotensine (ECA). Le thé vert inhibe l’activité de l’ECA par un mécanisme inhibiteur mixte . L’inhibition de l’ECA peut être l’une des raisons principales de l’activité diurétique et de l’augmentation du niveau de Na+ urinaire. En outre, le thé vert est également responsable de l’inhibition de l’activité de l’anhydrase carbonique. Le thé vert provoque une augmentation du taux de filtration glomérulaire par l’augmentation du flux sanguin rénal et du débit cardiaque, ce qui peut contribuer à l’activité diurétique. Les résultats de la présente étude établissent ces faits par une augmentation significative de l’activité diurétique du GTE d’une manière dose dépendante. L’ETG, lorsqu’il est associé à l’HCTZ, est capable de montrer une puissance diurétique supplémentaire par rapport au groupe traité par l’HCTZ seul.

L’inhibition de l’ECA associée à l’ETG entraîne une diminution de l’activité de l’aldostérone et une augmentation de la rétention du potassium . Conformément à cela, les résultats n’ont pas montré de perte significative de potassium avec le traitement par GTE. Dans les groupes combinés, l’ETG a également réduit de manière significative la perte de potassium par rapport au groupe traité par HCTZ seul. La propriété anti-inflammatoire de GTE peut également être un facteur contribuant à démontrer l’activité diurétique .

Les groupes traités avec une dose faible et élevée de GTE avec HCTZ ont montré une augmentation significative du potentiel diurétique en augmentant l’excrétion des ions Na+, le pourcentage de charge saline excrétée, l’action diurétique et les paramètres d’activité diurétique. Il est intéressant de noter que la perte de K+ dans les groupes combinés a été réduite de manière significative par rapport au groupe traité par HCTZ seul. Cette observation est très importante car le thé vert est capable de réduire l’hypokaliémie induite par l’HCTZ. De plus, dans les groupes combinés, le GTE provoque une augmentation de l’efficacité de l’HCTZ de manière dose dépendante.

5. Conclusion

De cette présente étude, on peut conclure que GTE, lorsqu’il est combiné avec HCTZ, a montré une augmentation significative de l’activité diurétique. L’observation la plus importante de cette étude est que même si l’association augmente le potentiel diurétique, elle est responsable de la diminution de la perte de potassium urinaire, ce qui réduit les risques d’hypokaliémie. Cette étude peut être prouvée bénéfique pour les patients hypertendus ischémiques où la dose de HCTZ peut être réduite et il est possible de minimiser les effets secondaires associés en présence de GTE.

Conflit d’intérêts

Les auteurs déclarent qu’il n’y a pas de conflit d’intérêts concernant la publication de cet article.