Immunophénotypage

L’immunophénotypage est une technique utilisée pour étudier les protéines exprimées par les cellules. Cette technique est couramment utilisée dans la recherche scientifique fondamentale et à des fins de diagnostic en laboratoire. Elle peut être réalisée sur une coupe de tissu (tissu frais ou fixé), une suspension cellulaire, etc. Un exemple est la détection de marqueur tumoral, comme dans le diagnostic de la leucémie. Elle implique le marquage des globules blancs avec des anticorps dirigés contre des protéines de surface de leur membrane. En choisissant les anticorps appropriés, on peut déterminer avec précision la différenciation des cellules leucémiques. Les cellules marquées sont traitées dans un cytomètre en flux, un instrument à laser capable d’analyser des milliers de cellules par seconde. L’ensemble de la procédure peut être réalisé sur des cellules provenant du sang, de la moelle osseuse ou du liquide céphalorachidien en quelques heures.

Un exemple d’information fournie par l’immunophénotypage : « Le rapport d’immunophénotypage par cytométrie en flux a indiqué que les cellules malignes étaient positives pour CD19, CD10, dimCD20, CD45, HLA-DR et la chaîne légère de l’immunoglobuline λ. Il n’y avait pas de coexpression de CD5 ou CD23 par la population de cellules B monoclonales. »

L’immunophénotypage est un test très courant de cytométrie en flux dans lequel des anticorps conjugués à des fluorophores sont utilisés comme sondes pour colorer les cellules cibles avec une avidité et une affinité élevées. Cette technique permet un phénotypage rapide et facile de chaque lignée cellulaire dans un échantillon hétérogène en fonction de la présence ou de l’absence d’une combinaison de protéines. Ainsi, la visibilité augmente dans les échantillons complexes.

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