2 Confinement des agents dangereux
Les animaux de recherche sont fréquemment employés dans des études au cours desquelles des produits chimiques, des agents biologiques et/ou des radionucléides dangereux sont administrés. Certaines caractéristiques techniques sont applicables à tous les dangers. Il s’agit notamment de l’isolement physique des animaux et des déchets dangereux ; des surfaces de la pièce qui sont monolithiques, étanches et faciles à désinfecter et qui ne favorisent pas l’accumulation de poussière ; de l’utilisation de BSC ou de hottes chimiques appropriées au danger et à l’expérience ; de l’augmentation des taux de renouvellement de l’air de la pièce pour diluer les contaminants environnementaux ; de l’établissement d’un flux d’air directionnel en configurant des diffuseurs d’alimentation et des registres d’évacuation pour éloigner les dangers des occupants humains ; et de la création de différentiels de pression d’air de la pièce pour s’assurer que les zones contenant des dangers ont une pression négative par rapport aux espaces environnants. Diverses ressources sont disponibles pour aider à déterminer les caractéristiques et les pratiques techniques appropriées des installations et des équipements afin de maintenir un environnement sûr (Adelberg et al., 1989 ; CDC-NIH, 2009 ; Commission on Physical Sciences, Mathematics and Applications, 1995 ; Evans, Lesnaw (1999) ; DiBerardinis, 1999 ; Liberman, 1995 ; Ruys, 1991b). Bon nombre des caractéristiques des installations décrites pour la quarantaine sont applicables et appropriées pour le confinement des agents dangereux. Cependant, le confinement et les mesures de protection associées sont souvent plus rigoureux.
Les dangers biologiques sont classés selon les niveaux de sécurité biologique 1 à 4, chaque niveau dictant des caractéristiques techniques et des pratiques de sécurité spécifiques (CDC-NIH, 2009). Les études sur les animaux avec des agents BSL-2 sont relativement courantes et le sont devenues davantage avec l’utilisation de vecteurs viraux pour les études de thérapie génique (Webber et William, 1999 ; Evans et Lesnaw, 1999). La demande d’études avec des agents de niveau de sécurité biologique 3 est moins courante, bien que de nombreuses installations pourraient bénéficier d’une installation de niveau de sécurité biologique 3 (ABSL-3) pour les animaux. Les études avec des agents de niveau 2 peuvent être menées dans des salles pour animaux en utilisant l’équipement approprié et les pratiques de niveau 2, mais elles sont menées de manière plus efficace et cohérente à un niveau de sécurité plus élevé dans une installation de niveau 2. En outre, une installation ABSL-2 est hautement souhaitable pour la mise en quarantaine des rongeurs infectés par des agents manifestes et/ou adventices ou dont l’état de santé est inconnu. Des descriptions détaillées des installations et des pratiques animales ABSL sont données dans d’autres textes (Barkley, 1979 ; Barkley et Richardson, 1984 ; Richmond, 1991, 1996 ; Hessler, 1995 ; White, 1996 ; Hessler et al., 1999 ; King et al., 1999).
Les caractéristiques de conception standard et les pratiques incorporées dans la plupart des installations animales répondent aux normes BSL-1. La complexité de la conception et des pratiques opérationnelles augmente à mesure que le niveau de biosécurité augmente. Les caractéristiques techniques supplémentaires peuvent inclure l’utilisation de sas, de douches traversantes et de stérilisateurs traversants ; la fourniture de dispositifs de confinement physique supplémentaires tels que des cubicules, une filtration HEPA sur l’échappement, des systèmes de surveillance environnementale complets et informatisés et des contrôles CVC automatisés ; et la fourniture d’une redondance et d’une alimentation de secours à tous les systèmes mécaniques critiques.
Le confinement des dangers volatils tels que les produits chimiques dangereux ou certains radio-isotopes est plus complexe que le confinement des particules, car les composés volatils traversent les filtres HEPA et peuvent ne pas être capturés par d’autres types de médias filtrants tels que le charbon actif. Les hottes chimiques (protection du personnel uniquement) ou les BSC à 100% d’échappement (Classe II Type B21) (protection du personnel et des produits), toutes deux reliées au système d’échappement du bâtiment, sont utiles pour le changement de cage et l’administration des dangers lorsque la volatilité est un problème. Bien qu’un équipement de confinement supplémentaire spécialisé qui capture les effluents des cages puisse être utilisé en association avec des cages à isolateur statique, il est plus facile de loger les cages dans des zones où le taux de renouvellement de l’air est élevé (>50 renouvellements complets de l’air par heure) tout en fournissant un flux d’air directionnel de sorte que l’air frais d’alimentation soit délivré à la zone occupée par le personnel et soit aspiré au-dessus des cages des animaux dans le système d’évacuation. Par exemple, un cubicule de 4 pi × 6 pi avec un diffuseur linéaire au plafond à l’avant du cubicule et un système d’évacuation à fentes horizontales à plusieurs niveaux le long du mur arrière, devant lequel est placé le support des cages, est utile pour les études utilisant des produits chimiques volatils dangereux. Des EPI supplémentaires peuvent également être nécessaires pour assurer la protection du personnel.
La décontamination des cages et l’élimination des déchets contaminés, tels que la literie, sont une préoccupation prééminente lorsque l’un ou l’autre ou les deux sont présumés dangereux. La literie doit être autoclavée avant d’être mise en décharge et les cages doivent être décontaminées avant toute manipulation ultérieure. La stérilisation des composants de la cage avant le traitement est utile lorsque les dangers sont thermolabiles, comme dans le cas de la plupart des dangers biologiques. Bien que certains produits chimiques dangereux soient thermolabiles, la plupart nécessitent une désactivation chimique ou doivent être éliminés sous forme de composé actif (Fox et al., 1980). Les cages jetables en polystyrène ou en polyéthylène sont utiles pour les produits chimiques très dangereux qui ne peuvent pas être facilement désactivés. Les cages et les déchets sont éliminés comme des déchets dangereux. Les BSC et les hottes chimiques de classe II peuvent être achetées avec une variété de caractéristiques utiles pour les études sur les animaux employant des produits dangereux, y compris une porte de passage dans la paroi de l’armoire, permettant de placer la cage directement dans un sac à risque biologique sans la retirer de l’armoire (BSC) ; un système d’élimination des déchets solides intégré dans la surface de travail de l’armoire (BSC) ; et/ou un petit évier à godets pour l’élimination des déchets liquides (hotte chimique). L’utilisation systématique d’un BSC de classe I conçu pour l’élimination de la litière dans le lavage des cages souillées, bénéfique pour le contrôle de la poussière, des allergènes et de la contamination, est fortement recommandée lors de la manipulation de cages contenant des agents dangereux, même après décontamination.
L’administration de radionucléides aux animaux impose le respect des normes de la Commission de réglementation nucléaire (Code of Federal Regulations, 1999). Ces normes exigent que les institutions utilisant des radionucléides soient autorisées et qu’elles veillent à ce que les expositions aux rayonnements de tout le personnel soient aussi faibles que raisonnablement possible (ALARA) par la mise en œuvre d’un programme de radioprotection approprié. Lors de l’utilisation de radio-isotopes in vivo, il faut prendre en considération le radio-isotope spécifique administré, en particulier sa demi-vie, son énergie et son activité biologique, ainsi que la quantité administrée ; la protection du personnel exposé aux animaux et aux déchets radioactifs ; et l’élimination des matériaux contaminés par les radio-isotopes, y compris les carcasses.
La demi-vie du radionucléide a un impact significatif sur les procédures à employer pour l’élimination des déchets et sur la manipulation des cages. Le fait de laisser les carcasses et les déchets se désintégrer pendant 10 demi-vies permet d’éliminer ces matériaux dans des flux de déchets non radioactifs. Par conséquent, l’administration de radio-isotopes à courte demi-vie permet de conserver sur place les matériaux contaminés pour qu’ils se désintègrent et soient ensuite éliminés comme déchets non radioactifs. Les carcasses sont congelées, et les cages et la literie sont stockées jusqu’à ce qu’elles puissent être traitées en toute sécurité. Avant de libérer les carcasses, les cages ou la litière, les niveaux d’activité des radio-isotopes sont confirmés à l’aide d’un dispositif ou d’une technique appropriés, tels qu’un compteur Geiger ou des lingettes de surface, par un personnel dûment formé. Les animaux, les cages et les déchets contaminés par des radio-isotopes à longue demi-vie doivent être éliminés dans des décharges appropriées par des personnes autorisées. Bien que des cages jetables soient utilisées, le plus souvent les cages sont vidées, la litière est traitée pour être éliminée hors site et les cages sont nettoyées à la main avec un décontaminant de radioactivité jusqu’à ce que l’activité ne soit plus détectable. Les cages sont ensuite traitées par des laveuses mécaniques.
Une attention particulière doit être accordée à l’utilisation des laveuses mécaniques pour assainir les cages et l’équipement connexe lorsqu’ils sont utilisés avec des agents dangereux. Comme certains laveurs mécaniques font recirculer l’eau de lavage ou de rinçage, les contaminants dangereux peuvent s’accumuler et contaminer d’autres équipements lavés dans l’appareil (Lipman, 1995). Dans ces circonstances, l’eau de lavage et/ou de rinçage doit être évacuée après le traitement des matières dangereuses. De nombreux laveurs de cage/rack peuvent être programmés pour que les eaux usées soient évacuées à la fin de chaque cycle, et/ou pour qu’il y ait des cycles de rinçage supplémentaires.