Brug af SDS til ekstraktion af sorghum- og majsproteiner til analyse ved frizonekapillarelektroforese (FZCE)†

To forskellige ekstraktionsmetoder til ekstraktion af sorghum- (Sorghum bicolor L. Moench.) opbevaringsproteiner til analyse ved frizonekapillarelektroforese (FZCE) blev sammenlignet. Et traditionelt opløsningsmiddel baseret på 60% t-butanol blev sammenlignet med en pH 10 boratbuffer indeholdende det anioniske detergent SDS efterfulgt af udfældning af nonkafiriner ved hjælp af 60% t-butanol. FZCE-analysen af begge typer ekstrakter viste identiske mønstre på trods af, at SDS skulle have givet alle proteinerne samme ladning-masseforhold. Denne metode blev også anvendt med succes på proteiner fra majs. Brugen af t-butanol til udfældning af nonkafiriner kombineret med elektroforese ved lav pH-værdi menes at have fjernet SDS fra lagringsproteinerne. SDS-ekstraktionsproceduren gav mere stabile ekstrakter til FZCE-analyse. Disse ekstrakter kunne også anvendes direkte til SDS-kapillarelektroforese-separationer (SDS-CE). Kafiriner fra 15 genotyper blev ekstraheret med denne fremgangsmåde og analyseret ved FZCE og SDS-CE. Opløsningen af kafirinerne ved FZCE var meget højere end SDS-CE, hvilket viser, at kafirinproteinerne havde en høj grad af variabilitet i ladningstætheden inden for en relativt lille molekylær størrelsesfordeling. Der kunne ses to forskellige grupper af α-kafiriner i FZCE-elektroferogrammerne.

Skriv et svar

Din e-mailadresse vil ikke blive publiceret.