La colocalización en microscopía se refiere a diferentes métodos de análisis de datos para caracterizar el grado de superposición entre dos canales en una imagen (convencionalmente llamados canales R y G, o canales rojo y verde, independientemente de la longitud de onda que hayan registrado realmente). Una aplicación típica en microscopía de fluorescencia es estudiar la presencia de dos objetivos marcados en la misma región de una célula.
Para una introducción accesible, consulte Coeficientes de colocalización y Aspectos básicos de la colocalización.
Tenga en cuenta que el desenfoque y el ruido afectan a la colocalización.
Vea Analizador de Colocalización y Teoría de la Colocalización para más detalles.
Colocación de objetos
Tenga en cuenta que el Analizador de Objetos en el Software Huygens también proporciona mediciones de colocalización a nivel de objeto. El Analizador de Colocalización trabaja más a nivel de toda la imagen, a pesar de que algunas estadísticas locales de las regiones de colocalización pueden ser fácilmente recuperadas.
Ambos analizadores trabajan, en este sentido, de forma complementaria.
- El Analizador de Objetos permite definir objetos (ver Segmentación de Objetos) y ver cuánto se superponen, en volumen o intensidad. Los objetos así definidos pueden solaparse con otros objetos, o no. Puede filtrar los objetos que no se colocalizan en absoluto.
- El Analizador de Colocalización explora toda la imagen para buscar regiones colocalizadoras basadas en los coeficientes de colocalización habituales. Estas regiones son entonces segmentadas y tratadas como objetos a analizar. Por lo tanto, estos objetos son siempre volúmenes de intersección.