Användning av SDS för att extrahera sorghum- och majsproteiner för analys med kapillärelektrofores i frizon (FZCE)†

Två olika extraktionsmetoder för att extrahera sorghum (Sorghum bicolor L. Moench.) för lagringsproteiner för analys med kapillärelektrofores i frizon (FZCE) har jämförts. Ett traditionellt lösningsmedel baserat på 60 % t-butanol jämfördes med en boratbuffert med pH 10 som innehåller det anjoniska tvättmedlet SDS följt av utfällning av ickekafiriner med 60 % t-butanol. FZCE-analysen av båda typerna av extrakt visade identiska mönster, trots att SDS borde ha gett alla proteiner samma förhållande mellan laddning och massa. Denna metodik tillämpades också framgångsrikt på proteiner från majs. Användningen av t-butanol för utfällning av ickekafiriner, i kombination med elektrofores vid lågt pH, antas ha avlägsnat SDS från lagringsproteinerna. SDS-extraktionsförfarandet gav stabilare extrakt för FZCE-analys. Dessa extrakt kunde också användas direkt för SDS-kapillärelektroforesseparation (SDS-CE). Kafiriner från 15 genotyper extraherades med detta förfarande och analyserades med FZCE och SDS-CE. Upplösningen av kafirinerna genom FZCE var mycket högre än SDS-CE, vilket visar att kafirinproteinerna hade en hög grad av variation i laddningstäthet inom en relativt liten molekylstorleksfördelning. Två distinkta grupper av α-kafiriner kunde ses i FZCE-elektroherogrammen.

Lämna ett svar

Din e-postadress kommer inte publiceras.