Utilizarea SDS pentru extragerea proteinelor din sorg și porumb pentru analiza prin electroforeză capilară în zonă liberă (FZCE)†

Au fost comparate două metode de extracție diferite pentru extragerea proteinelor de depozitare din sorg (Sorghum bicolor L. Moench.) pentru analiza prin electroforeză capilară în zonă liberă (FZCE). Un solvent tradițional bazat pe 60% t-butanol a fost comparat cu un tampon de borat cu pH 10 care conține detergentul anionic SDS urmat de precipitarea nonkafirinelor folosind 60% t-butanol. Analiza FZCE a ambelor tipuri de extracte a evidențiat modele identice, în ciuda faptului că SDS ar fi trebuit să dea tuturor proteinelor raporturi egale între sarcină și masă. Această metodologie a fost, de asemenea, aplicată cu succes la proteinele din porumb. Se consideră că utilizarea t-butanolului pentru precipitarea nonkafirinelor, combinată cu electroforeza la un pH scăzut, a eliminat SDS din proteinele de depozitare. Procedura de extracție cu SDS a produs extracte mai stabile pentru analiza FZCE. Aceste extracte ar putea fi, de asemenea, utilizate direct pentru separări prin electroforeză capilară SDS (SDS-CE). Kafirinele din 15 genotipuri au fost extrase cu această procedură și analizate prin FZCE și SDS-CE. Rezoluția kafirinelor prin FZCE a fost mult mai mare decât prin SDS-CE, demonstrând că proteinele de kafirină posedau un nivel ridicat de variabilitate a densității de sarcină în cadrul unei distribuții de dimensiuni moleculare relativ mici. Două grupuri distincte de α-kafirine au putut fi observate în electroferogramele FZCE.

.

Lasă un răspuns

Adresa ta de email nu va fi publicată.