Utilização de SDS para Extrair Proteínas de Sorgo e Milho para Eletroforese Capilar de Zona Livre (FZCE) Analysis†

Dois diferentes métodos de extração para extração de sorgo (Sorghum bicolor L. Moench.) foram comparadas proteínas de armazenamento para análise de eletroforese capilar de zona livre (FZCE). Um solvente tradicional à base de 60% t-butanol foi comparado com um tampão borato de pH 10 contendo o detergente aniônico SDS seguido pela precipitação de não kafirinas utilizando 60% t-butanol. A análise FZCE dos dois tipos de extratos mostrou padrões idênticos, apesar do fato de que a SDS deveria ter dado a todas as proteínas a mesma relação carga/massa. Esta metodologia também foi aplicada com sucesso às proteínas do milho. Pensa-se que o uso do t-butanol para precipitar as não kafirinas, combinado com a electroforese a pH baixo, removeu a SDS das proteínas armazenadas. O procedimento de extração da SDS produziu extratos mais estáveis para análise de FZCE. Estes extratos também poderiam ser utilizados diretamente para a separação da eletroforese capilar da SDS (SDS-CE). As Kafirinas de 15 genótipos foram extraídas com este procedimento e analisadas por FZCE e SDS-CE. A resolução das kafirinas por FZCE foi muito superior à SDS-CE, demonstrando que as proteínas kafirinas possuíam um alto nível de variabilidade de densidade de carga dentro de uma distribuição de tamanho molecular relativamente pequena. Dois grupos distintos de α-kafirins puderam ser vistos nos eletroferogramas da FZCE.

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