Diferença Electroforese em Gel (DIGE)

Análise de proteínas está a tornar-se cada vez mais uma pedra angular na decifração dos mecanismos moleculares da vida. A proteômica, a análise em larga escala e de alta sensibilidade das proteínas, já é fundamental para as novas ciências da vida, como a Biologia de Sistemas e a Medicina de Sistemas. A proteômica, no entanto, depende fortemente dos avanços passados e futuros dos métodos de purificação e análise de proteínas. O DIGE, sendo capaz de quantificar proteínas na sua forma intacta, é um dos poucos métodos que podem facilitar este tipo de análise e ainda fornecer as isoformas proteicas em estado MS compatível para posterior identificação e caracterização com alta sensibilidade analítica. Electroforese Diferencial de Gel: Métodos e Protocolos introduz o conceito de DIGE e suas vantagens na análise quantitativa de proteínas. Fornece protocolos detalhados e notas importantes sobre os aspectos práticos do DIGE com aplicações tanto genéricas como específicas nas diversas áreas da Proteômica Quantitativa. Dividido em quatro seções concisas, este volume detalhado abre com os fundamentos do DIGE, a técnica e seus detalhes práticos com foco no planejamento de uma experiência DIGE e sua análise de dados. A próxima seção introduz vários métodos DIGE, desde aqueles empregados por cientistas de todo o mundo até métodos mais inovadores, dando uma olhada no que está no horizonte no mundo DIGE. O volume se encerra com uma visão geral da ampla gama de aplicações DIGE desde a Proteômica Clínica até aplicações em animais, plantas e proteômicas microbianas. Escrito no formato Molecular Biology™, os capítulos contêm introduções aos seus respectivos tópicos, listas de materiais e reagentes necessários, protocolos laboratoriais passo-a-passo, facilmente reproduzíveis, e notas sobre a resolução de problemas e evitar armadilhas conhecidas.

Authoritative and accessible, Differential Gel Electrophoresis: Métodos e protocolos podem ser usados por novatos com alguma formação em bioquímica ou biologia molecular, bem como por especialistas em proteômica que gostariam de aprofundar seu conhecimento do DIGE e seu emprego em muitas hifenizações e áreas de aplicação. Com seus muitos protocolos, aplicações e variantes metodológicas, é também uma referência única para todos aqueles que procuram detalhes fundamentais sobre o princípio de trabalho do DIGE e idéias para possíveis usos futuros do DIGE em novas abordagens analíticas.

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