Herpes Simplex Virus

Herpes simplex virus, typ 1 i 2 (HSV-1 i HSV-2) są wirusami DNA, które powodują infekcje trwające całe życie, występujące na całym świecie bez sezonowego rozkładu. Są one niezwykle powszechne – w Stanach Zjednoczonych zakażonych jest co najmniej 50 milionów osób. HSV jest najczęstszą przyczyną zmian śluzówkowo-skórnych narządów płciowych. Wirus jest przenoszony przez bezpośredni kontakt z wydzielinami, a okres inkubacji do wystąpienia zmian wynosi od 1 do 26 dni. Bezobjawowe nosicielstwo jest powszechne i wynosi od 25% do 90%, ponieważ osoby z przeciwciałami zarówno przeciwko HSV-1 jak i HSV-2 nie przypominają sobie zmian w obrębie jamy ustnej i warg sromowych ani narządów płciowych. Dlatego też większość zakażeń odbywa się drogą subkliniczną. Zarówno zmiany genitalne, jak i oralno-wargowe mogą być wywołane przez HSV-1 lub HSV-2 i są klinicznie nie do odróżnienia. U dzieci poniżej 12 roku życia występowanie HSV-2 jako zmiany pierwotnej jest rzadsze niż u aktywnej seksualnie młodzieży (w wieku 12-18 lat), ale w ciągu ostatnich 10 lat wzrosło. Ponadto, nastąpił wzrost występowania HSV-1 jako pierwotnej zmiany w narządach płciowych.14

Wykrywanie HSV zależy w dużym stopniu od odpowiedniego pobrania próbki, czasu pobrania próbki w stosunku do prezentacji pęcherzyków oraz późniejszego transportu i przetwarzania w laboratorium. Próbki nie powinny być pobierane za pomocą drewnianych wacików lub wacików z alginianu wapnia, ponieważ będą one przeszkadzać w izolacji wirusa. Wymazy dakronowe lub rayonowe powinny być umieszczone w podłożu do transportu wirusów (VTM), które jest specjalnie opracowane dla wirusów i zawiera antybiotyki w celu kontroli wzrostu bakterii. Niektóre badania wykazały zwiększony odzysk, gdy próbki są umieszczone w lodzie, ale niektóre media transportowe mogą być przechowywane i transportowane w temperaturze pokojowej. Świadczeniodawcy powinni zasięgnąć informacji o zalecanych optymalnych parametrach pobierania próbek w poszczególnych laboratoriach.14

Hodowla wirusów i/lub badanie przeciwciał immunofluorescencyjnych (FA) z materiału pobranego ze zmian chorobowych są nadal podstawowymi metodami diagnostycznymi. Materiał wysiękowy lub resztki martwicze powinny być usunięte za pomocą wacika przed pobraniem próbki zmiany. Test FA może być wykonany bezpośrednio ze szkiełka uzyskanego przy łóżku pacjenta lub przesłanego w VTM. Pobranie próbki powinno obejmować usunięcie powierzchni zmiany pęcherzykowej i pobranie nie tylko płynu, ale także komórek skóry znajdujących się u podstawy zmiany. Należy uważać, aby nie spowodować krwawienia, ponieważ może to zakłócić wykonanie niektórych testów. Przeciwciała neutralizujące we krwi mogą również zakłócać wyniki niektórych testów. Test szkiełkowy FA oferuje korzyści w postaci oceny jakości przesłanej próbki (komórki nabłonka muszą być obecne) i wykonania testu w tym samym dniu co pobranie próbki. Czułość testu wynosi od 10% do 87% w porównaniu z hodowlą.14

HSV wywołuje efekt cytopatyczny (CPE) w podatnych liniach hodowli komórkowych szybko, zazwyczaj w ciągu 24 do 48 godzin, a 90% hodowli jest dodatnich w 5 dniu. Hodowla ma doskonałą czułość, gdy obecne są zmiany chorobowe i jest bardziej prawdopodobne, że będzie pozytywna u pacjentów, którzy mają zmiany pęcherzykowe w porównaniu z wrzodziejącymi oraz u pacjentów, u których próbki zostały pobrane z pierwszej zmiany epizodycznej w porównaniu z nawracającą zmianą chorobową. Izolaty powinny być typowane w celu ustalenia, czy są to HSV-1 czy 2, ponieważ 12-miesięczne nawroty są częstsze w przypadku HSV-2 (90%) niż HSV-1 (55%). Chociaż obecność HSV-2 może być częstszym skutkiem napaści na tle seksualnym u dziecka, wyniki dotyczące zarówno HSV-1, jak i HSV-2 powinny być ostrożnie analizowane.9,14 Metody immunoenzymatyczne (EIA) nie są wystarczająco czułe u pacjentów bezobjawowych, aby można je było stosować w sposób wiarygodny, i nie powinny być wykonywane u dzieci, u których podejrzewa się molestowanie. Preparat wymazu Tzancka, który ocenia zmiany cytologiczne związane z zakażeniem HSV, nie jest ani wystarczająco swoisty, ani czuły, aby stosować go jako test do diagnostyki HSV.

Wykazano, że metody NAAT, takie jak PCR, są bardziej czułe niż hodowla, zwłaszcza w przypadku zmian skórnych i u pacjentów z zakażeniem bezobjawowym.14 Jednak żaden NAAT nie jest obecnie zatwierdzony przez FDA do wykrywania HSV z jakiegokolwiek źródła. Niektóre laboratoria zwalidowały próbki skóry/naskórka do badania NAAT, a świadczeniodawcy powinni sprawdzić dostępność tych próbek w swoich laboratoriach referencyjnych.

Testowanie przeciwciał ma ograniczone zastosowanie, ale może być pomocne w rozpoznaniu u osoby z chorobą pierwotną, jeśli zaobserwuje się czterokrotny wzrost miana, zwłaszcza u pacjenta, u którego wiadomo, że sprawca ma w wywiadzie HSV lub inne STI, a zmiany w narządach płciowych nie zostały zauważone w czasie badania lub w trakcie kontroli. Co ważne, należy zlecić wykonanie testów opartych na glikoproteinie G specyficznej dla danego typu wirusa, ponieważ są to jedyne wiarygodne testy pozwalające na rozróżnienie HSV-1 i HSV-2. Obecnie dostępne testy POCT (point-of-care tests) do wykrywania HSV-2 mogą dawać fałszywie dodatnie wyniki w populacjach pacjentów z niskim prawdopodobieństwem zakażenia HSV, we wczesnych stadiach zakażenia oraz dawać fałszywie ujemne wyniki u pacjentów z zakażeniem HSV-2, u których wcześniej wystąpiło zakażenie HSV-1. Serokonwersja trwa zazwyczaj od 2 do 3 tygodni, zanim testy te mogą być dokładnie zinterpretowane.1,14

.