Acid-sensing ion channels (ASICs) zijn spanningsonafhankelijke kationkanalen die dalingen in extracellulaire pH detecteren. Dysregulatie van ASICs ligt ten grondslag aan een aantal pathologieën. Van bijzonder belang is ASIC3, dat wordt erkend als een belangrijke sensor van zuur-geïnduceerde pijn en belangrijk is bij het ontstaan van pijn ten gevolge van ontstekingsziekten, zoals reumatoïde artritis. De identificatie van nieuwe ASIC3 modulatoren en het mechanistisch inzicht in hoe deze verbindingen ASIC3 moduleren zou dus belangrijk kunnen zijn voor de ontwikkeling van nieuwe strategieën om de nadelige effecten van ontregelde ASIC3 activiteit in ontstekingen tegen te gaan. Hier rapporteren we de identificatie van nieuwe ASIC3 modulatoren gebaseerd op de ASIC3 agonist, 2-guanidine-4-methylquinazoline (GMQ). Door middel van een GMQ-geleide in silico screening van Food and Drug administration (FDA)-goedgekeurde geneesmiddelen, werden 5 verbindingen geselecteerd en getest op hun modulatie van rat ASIC3 (rASIC3) met behulp van hele-cel patch-clamp elektrofysiologie. Van de gekozen geneesmiddelen produceerde guanabenz (GBZ), een α2-adrenoceptor agonist, gelijkaardige effecten als GMQ op rASIC3, waarbij het kanaal geactiveerd werd bij fysiologische pH (pH 7,4) en de respons op mild zure (pH 7) stimuli versterkt werd. Sephin1, een GBZ derivaat dat α2-adrenoceptor activiteit mist, is voorgesteld om te werken als een selectieve remmer van een regulerende subeenheid van het stress-geïnduceerde eiwit fosfatase 1 (PPP1R15A) met veelbelovend therapeutisch potentieel voor de behandeling van multiple sclerose. Wij vonden echter dat net als GBZ, sephin1 rASIC3 activeert bij pH 7,4 en de respons op zure stimulatie (pH 7) versterkt, d.w.z. sephin1 is een nieuwe modulator van rASIC3. Bovendien toonden docking-experimenten aan dat, net als GMQ, GBZ en sephin1 waarschijnlijk interageren met het niet-proton ligand sensordomein van rASIC3. In het algemeen tonen deze gegevens het nut aan van computationele analyse voor het identificeren van nieuwe ASIC3-modulatoren, die kunnen worden gevalideerd met elektrofysiologische analyse en kunnen leiden tot de ontwikkeling van betere verbindingen voor het richten van ASIC3 bij de behandeling van ontstekingsaandoeningen.