Serum albumine

Structure

Serum albumine is het meest voorkomende eiwit in het bloedplasma van alle gewervelde dieren, waarbij de concentratie in menselijk serum 35-50 mg/mL bedraagt (Peters, 1996). Humaan serumalbumine (HSA) heeft een moleculaire massa van 66 348 Da en is samengesteld uit drie homologe domeinen, genummerd I, II en III (figuur 1) (He en Carter, 1992; Peters, 1996; Sugio et al., 1999). Elk domein is gegroepeerd in subdomeinen A en B die gemeenschappelijke structurele motieven bezitten. De twee belangrijkste regio’s die verantwoordelijk zijn voor ligand-binding aan HSA staan bekend als Sudlow’s Site I en II, respectievelijk gelegen in subdomein IIA en IIIA (figuur 1) (Sudlow et al., 1976; Peters, 1996). Albumine wordt gecodeerd door één enkel gen, dat op een co-dominante manier tot expressie komt, waarbij beide allelen worden getranscribeerd en vertaald (Hawkins en Dugaiczyk, 1982; Peters, 1996). Het menselijke albumine-gen bevindt zich op de lange arm van chromosoom 4 op positie q13.3.

Functie

Albumine wordt voornamelijk door de lever gesynthetiseerd, waarbij de menselijke lever ~13,9 g HSA per dag produceert (Peters, 1996). HSA heeft een geschatte halfwaardetijd van 19 dagen en wordt effectiever afgebroken als het gedenatureerd of structureel veranderd is (Peters, 1996). Albumine heeft een verscheidenheid aan belangrijke functies en is verantwoordelijk voor 80% van de colloïdale osmotische druk van bloed (Peters, 1996). Belangrijk is dat albumine in staat is verschillende endogene moleculen te binden, waaronder lange-keten vetzuren, steroïden, L-tryptofaan, enz. (Kragh-Hansen, 1981; Peters, 1996; Evans, 2002). Bovendien is albumine ook betrokken bij het transport van ionen in de circulatie, waaronder koper, zink, calcium, enz. (Peters, 1996).

Daarnaast is dit vitale eiwit in staat om exogene verbindingen en geneesmiddelen te binden, zoals warfarine, ibuprofen, chloorpromazine en naproxen, waarbij de affiniteit van hun binding hun activiteit en halfwaardetijd aanzienlijk beïnvloedt (Kragh-Hansen, 1981; Peters, 1996; Evans, 2002). Bovendien fungeert albumine ook als drager van toxisch afval, het bindt bilirubine, het product van de afbraak van heem, om het naar de lever af te voeren voor uitscheiding door de lever (Peters, 1996). Interessant is dat albumine ook wordt verondersteld te werken als een anti-oxidant vanwege zijn vermogen om: (1) gebonden stoffen te beschermen tegen peroxidatieve schade (bijv. vetzuren en lipoproteïnen); en (2) vrij koper te binden, waardoor de redoxactiviteit en de productie van vrije radicalen beperkt worden (Peters, 1996; Evans, 2002). Tenslotte is albumine een bron van thiolen die gretige reactieve zuurstof- en stikstofspecies opruimers zijn (Peters, 1996; Evans, 2002).

Distributie

Het is interessant dat albumine overwegend aanwezig is in de extravasculaire ruimte (~242 g) in plaats van de intravasculaire ruimte (~118 g) (Peters, 1996; Evans, 2002). In feite is het eiwit overwegend aanwezig in extracellulaire locaties zoals huid, darm, spieren, andere vloeistoffen (d.w.z. cerebrospinaal, pleuraal, enz.) en afscheidingen (d.w.z. zweet, tranen en melk) (Peters, 1996). Intracellulair zijn echter zeer lage concentraties albumine aanwezig (Peters, 1996). Albumine keert terug van de extravasculaire ruimte naar de circulatie via het lymfestelsel, en maakt ~28 “reizen” in en uit het lymfestelsel tijdens zijn leven (Peters, 1996; Evans, 2002).

Na afscheiding uit hepatocyten komt albumine in de circulatie en transloceert naar de extracellulaire ruimte door de poriën van sinusoïdaal of venestervormig endotheel in bepaalde organen, zoals de lever, pancreas, dunne darm en beenmerg (Peters, 1996). In organen waar een continu endotheel overheerst, wordt nu echter aangenomen dat albumine het endotheel kan passeren via actieve transcytotische mechanismen, waaronder receptormedieerde mechanismen (b.v, albondine; zie het hoofdstuk “Cellulaire albumine-bindende eiwitten”).

Accumulatie van albumine in het tumorinterstitium

Vaste tumoren bezitten gewoonlijk een onrijpe, zeer permeabele vasculatuur die wordt beïnvloed door vasculaire permeabiliteitsverhogende factoren (b.v, stikstofmonoxide) (Carmeliet en Jain, 2000; Maeda et al., 2000; Greish, 2007; van der Veldt et al., 2008). Desondanks is er over het algemeen onvoldoende lymfedrainage (Carmeliet en Jain, 2000; Maeda et al., 2000; Greish, 2007). Dit leidt vervolgens tot een ophoping van macromoleculen (>40 kDa) in het tumorinterstitium, en dit staat bekend als het versterkte permeatie- en retentie-effect (figuur 2) (Maeda et al., 2000; Greish, 2007). Van belang is dat Matsumura en Maeda (1986) aantoonden dat een intraveneus geïnjecteerd Evans blauw-albumine complex zich ophoopte in sarcoma 180 tumoren van ddY muizen. De retentie van albumine in tumoren is sindsdien waargenomen in verschillende experimentele vaste tumoren (b.v. sarcoom, ovariumcarcinoom, Novikof hepatoma, enz.) met gebruikmaking van radioactief gelabeld of met kleurstof gecomplexeerd serumalbumine (Peterson en Appelgren, 1973; Sinn et al, 1990; Andersson et al., 1991; Schilling et al., 1992; Stehle et al., 1997; Wunder et al., 1997).

Verder is in een aantal studies voorgesteld dat tumoren een plaats zijn van albumine katabolisme (Hradec, 1958; Andersson et al., 1991; Schilling et al., 1992; Stehle et al., 1997). Bijvoorbeeld, in een sarcomamodel van de muis (C57/RL6J), geïnjecteerd met 3H-raffinose gelabeld albumine, werden ten minste 2-3-voudig hogere niveaus van 3H waargenomen in de lysosomen van tumoren in vergelijking met lysosomen van normaal weefsel (Andersson et al., 1991). Verder hebben studies aangetoond dat albumine een kortere halfwaardetijd heeft en een hogere turnover in tumordragende muizen, ondanks een compenserende toename in de leveralbuminesynthese, vergeleken met niet-tumordragende muizen (Hradec, 1958). Vandaar dat er is gesuggereerd dat tumoren albumine gebruiken als energiebron, door het afbreken van albumine in de samenstellende aminozuren in lysosomen, die vervolgens door kankercellen worden gebruikt voor hun versnelde groei (Stehle et al., 1997). Bovendien hebben studies gesuggereerd dat de hypoalbuminiemie die duidelijk is bij kankerpatiënten het resultaat is van albumine katabolisme door de tumor (Stehle et al., 1997).

Niettemin hebben sommige van deze eerdere studies te lijden onder verschillende experimentele beperkingen. Het is bijvoorbeeld moeilijk om zuivere lysosomale fracties te verkrijgen en daarom is het nodig om deze studies te reproduceren en de zuiverheid van fracties te testen met behulp van goed gevestigde membraan- en organelmarkers (Graham, 2002; Yamagishi et al., 2013). Bovendien kunnen verschillende andere in vivo factoren de afbraak en het katabolisme van albumine beïnvloeden (bv. niveaus van corticosteroïden) (Peters, 1996). Daarom is een duidelijke relatie niet vastgesteld en zijn aanvullende in vivo studies nodig om de intracellulaire distributie en het katabolisme van albumine door tumoren te ondersteunen.

Meer recent hebben Commisso et al. waargenomen dat kankercellen met endogene oncogene Ras-mutaties verhoogde niveaus van macropinocytose in vitro en in vivo hebben (Commisso et al., 2013). Bovendien werd aangetoond dat FITC-gelabeld albumine werd geïnternaliseerd via macropinocytose en vervolgens resulteerde in verhoogde niveaus van glutamaat en α-ketoglutaraat in oncogene Ras-getransformeerde cellen (Commisso et al., 2013). Interessant is dat de afname in proliferatie van oncogene Ras-expresserende cellen na glutamine deprivatie bleek te worden hersteld door extracellulaire albumine suppletie (Commisso et al., 2013). Deze bevindingen suggereren dat macropinocytose van albumine voedingsstoffen levert om de proliferatie van kankercellen in stand te houden (Commisso et al., 2013).

Cellulaire albuminebindende eiwitten

Gezien het belang van albumine, is een aantal putatieve albuminebindende eiwitten en receptoren geïdentificeerd in verschillende weefsels en cellijnen (tabel 1), waaronder de nier (Zhai et al., 2000; Amsellem et al., 2010), endotheel (Schnitzer en Bravo, 1993), fibroblasten (Porter et al., 1995), en tumorceloppervlakken (Fritzsche et al., 2004). In het bijzonder zijn er zeven membraan-geassocieerde albumine-bindende eiwitten ontdekt, namelijk: albondine/glycoproteïne 60 (gp60) (Schnitzer et al., 1988), glycoproteïne 18 (gp18) (Ghinea et al., 1988), glycoproteïne 30 (gp30) (Ghinea et al, 1988), de neonatale Fc-receptor (FcRn) (Roopenian en Akilesh, 2007), heterogene nucleaire ribonucleoproteïnen (hnRNPs) (Fritzsche et al., 2004), calreticulin (Fritzsche et al., 2004), cubilin (Zhai et al., 2000; Amsellem et al., 2010), en megalin (Zhai et al., 2000; Amsellem et al., 2010). Bovendien is een afgescheiden albuminebindend eiwit geïdentificeerd dat bekend staat als secreted protein, acidic and rich in cysteine (SPARC) (Schnitzer en Oh, 1992). Gezien hun belang bij de opname van albumine door cellen, wordt elk van deze eiwitten hieronder in detail beschreven.

Albondin/gp60

Albondin (gp60) is een 60 kDa glycoproteïne dat fungeert als een albumine-receptor die wijd verspreid is, maar selectief tot expressie komt op het plasmamembraan van continu endotheel (behalve in de hersenen), waar het de capillaire permeabiliteit verhoogt (Ghinea et al., 1988, 1989; Schnitzer et al., 1988; Schnitzer, 1992; Schnitzer en Oh, 1994; Tiruppathi et al., 1996). Albondine bindt niet alleen specifiek natief albumine, maar vergemakkelijkt ook de internalisatie en daaropvolgende transcytose (Milici et al., 1987; Schnitzer, 1992; Schnitzer and Oh, 1994; Tiruppathi et al., 1996).

Voorgesteld is dat ~50% van albumine het capillair verlaat via albondine, waarbij de rest deze barrière passeert via intercellulaire juncties en/of vloeistof-fase mechanismen (Schnitzer, 1993; Schnitzer and Oh, 1994). Bovendien is aangetoond dat de internalisatie van albondine plaatsvindt via een caveolin-afhankelijk endocytotisch proces dat resulteert in transcytose en niet lijkt in te gaan op het degradatieve endosoom-lysosoom systeem (Schnitzer, 1993; Schnitzer en Bravo, 1993; Schnitzer et al., 1995; Tiruppathi et al., 1997; Iancu et al., 2011).

gp18 en gp30

Zowel gp18 als gp30 binden zich gretig aan conformationeel gemodificeerd albumine (d.w.z, met goud gelabeld albumine, formaldehyde- of maleïnezuuranhydridebehandeld albumine) en hebben geen preferentiële interactie met natief albumine, vergelijkbaar met andere bekende scavenger receptoren (Ghinea et al., 1989; Schnitzer en Oh, 1992, 1994; Schnitzer et al., 1992; Schnitzer en Bravo, 1993). In tegenstelling tot albondine, worden gp18 en gp30 gevonden op een verscheidenheid van cellen, zoals macrofagen en fibroblasten, en een reeks van endotheelcellen (Schnitzer et al., 1992). Bovendien werd vastgesteld dat gp18 tot expressie komt in menselijke MDA-MB-453 borstkankercellen (Wang et al., 1994). Deze scavenger receptoren binden en leiden gemodificeerde albumines voor degradatie, misschien als onderdeel van eiwitkatabolisme of als een beschermende route om veranderde, oude, beschadigde of potentieel schadelijke albumines te verwijderen (Schnitzer, 1993; Schnitzer en Bravo, 1993). Albumine kan worden gemodificeerd door oxidatie, niet-enzymatische glycatie, maleylering, etc. als gevolg van normale veroudering of als een beschermende of pathologische reactie (Schnitzer, 1993; Peters, 1996). Gedenatureerd of gemodificeerd albumine wordt sneller en efficiënter afgebroken dan natief albumine, wat suggereert dat deze veranderingen albuminemoleculen selecteren voor afbraak (Peters, 1996).

SPARC

SPARC is ook bekend als osteonectine en BM-40 en wordt door verschillende celtypen uitgescheiden (Brekken en Sage, 2001). Interessant is dat SPARC sterk tot expressie komt in maligne cellen en stromale cellen die geassocieerd worden met neoplasie (Porter et al., 1995; Podhajcer et al., 2008). SPARC bezit albumine-bindende eigenschappen en interageert specifiek met natief albumine op een vergelijkbare manier als albondine, maar verschillend van 18 tot gp30 die conformationeel gewijzigd albumine binden (Schnitzer en Oh, 1992). Specifiek herkennen anti-SPARC antilichamen ook albondine, maar niet 18 of gp30, wat suggereert dat SPARC en albondine een natief albumine-bindend domein delen (Schnitzer en Oh, 1992). Er is echter geen bewijs dat SPARC de opname van albumine in tumoren medieert. Er is gesteld dat het vermogen van SPARC om albumine te binden in het tumorinterstitium de accumulatie van albumine-gebonden geneesmiddelen in de tumorruimte bevordert (Desai et al., 2008, 2009). Bovendien toonde een voorlopige klinische studie aan dat SPARC-expressie correleerde met de respons op behandeling met paclitaxel-geladen nanodeeltjes van albumine (nab-paclitaxel of Abraxane®), waarbij SPARC-positieve patiënten een betere klinische uitkomst hadden (Desai et al., 2009). Tegenstrijdige gegevens in een KPfC-muismodel hebben deze hypothese echter in twijfel getrokken, aangezien SPARC-deficiëntie de intra-tumorale concentraties van Abraxane® niet veranderde (Neesse et al., 2014). Bijgevolg zijn verdere studies nodig om deze hypothese te valideren, met inbegrip van grotere klinische studies met een groter aantal patiënten. Momenteel wordt in een fase III-studie (NCT00785291), door het National Cancer Institute, geëvalueerd of SPARC-expressie in serum de respons van patiënten op Abraxane® voorspelt, en dit kan ons inzicht in de rol van SPARC in albumine-accumulatie door tumoren bevorderen.

hnRNPs en Calreticulin

Vijf verschillende albumine-bindende eiwitten zijn geïdentificeerd uit plasmamembranen van menselijke kankercellijnen (d.w.z., CCRF-CEM T-cell leukemie, MV3 melanoom en MCF7 borstcarcinoom) (Fritzsche et al., 2004). Vier van deze eiwitten werden geïdentificeerd als leden van de hnRNP-familie, waaronder hnRNP A2/B1, hnRNP C1, hnRNP A1 en hnRNP A3, en het vijfde eiwit bleek calreticulin te zijn (Fritzsche et al., 2004). Calreticuline werd voor het eerst beschreven als een endoplasmatisch reticulum chaperon en calcium signaleringseiwit, maar sindsdien is aangetoond dat het betrokken is bij verschillende cellulaire functies, waaronder celadhesie, modulatie van bloedplaatjes-collageen interacties (wondgenezing) en apoptose (Mendlovic en Conconi, 2010). De functies van de hnRNP-familie zijn niet goed gekarakteriseerd. De meeste leden van de hnRNP-familie zijn echter beschreven als nucleaire RNA-bindende eiwitten die betrokken zijn bij de verwerking van pre-mRNA, zoals RNA-splicing, export en stabiliteit (Chaudhury et al., 2010). Interessant is dat hnRNPs zijn voorgesteld om een rol te spelen in carcinogenese, waar hun overexpressie fungeert als biomarkers voor de vroege detectie van tumoren (Han et al., 2013). De betekenis van deze bevindingen is momenteel onduidelijk en het moet nog worden vastgesteld of deze eiwitten betrokken zijn bij albumine-gemedieerde opname.

FcRn

FcRn komt tot expressie in meerdere celtypen en weefsels, waaronder antigeen-presenterende cellen, vasculair endotheel, darm, longen, nieren en de bloed-hersenbarrière (BBB) (d.w.z, endotheel en plexus choroideus) (Roopenian en Akilesh, 2007). Deze receptor beschermt albumine en IgG tegen afbraak door beide eiwitten alleen bij een lage pH (pH < 6,5) in zure endosomen met hoge affiniteit te binden, waardoor hun afbraak via de lysosomale route wordt voorkomen en ze terugkeren naar de extracellulaire ruimte (pH 7,4) (Chaudhury et al., 2003; Ober et al., 2004; Anderson et al., 2006; Andersen et al., 2012). Dit verlengt bijgevolg de halfwaardetijd van serumalbumine (Chaudhury et al., 2003; Anderson et al., 2006; Sarav et al., 2009). De rol van deze receptor bij de opname van albumine door tumoren blijft onduidelijk.

Cubilin en Megalin

Cubilin is een multi-ligand receptor die het meest bekend is vanwege zijn betrokkenheid bij de intestinale opname van de intrinsieke factor vitamine B12 complex (Seetharam et al., 1997). Bovendien is aangetoond dat cubiline betrokken is bij de endocytose en het transcellulaire transport van talrijke liganden, waaronder albumine (Birn et al., 2000). Cubiline is gelokaliseerd in absorberende darmcellen, placenta, viscerale dooierzakcellen en proximale tubuli van de nieren (Christensen en Birn, 2002). Megalin is een groot trans-membraaneiwit waarvan is aangetoond dat het ook albumine bindt (Cui et al., 1996). Dit eiwit komt op grotere schaal tot expressie dan cubiline en is aanwezig in de plexus choroideus, proximale tubuluscellen van de nieren, thyrocyten, enz. (tabel 1) (Christensen en Birn, 2002).

Interessant is dat megalin zich met hoge affiniteit aan cubilin bindt en er is gesuggereerd dat megalin als co-receptor bijdraagt tot de internalisatie van cubilin-ligandcomplexen (Moestrup et al., 1998; Christensen en Birn, 2002). Bovendien bindt cubilin ook amnionloos, een eiwit dat noodzakelijk is voor de expressie van cubilin op de celmembraan (Amsellem et al., 2010). Cubiline speelt, samen met megalin, een essentiële rol bij de opname van albumine (d.w.z. reabsorptie) door de proximale tubuli van de nieren (Zhai et al., 2000; Amsellem et al., 2010). Cubiline- en/of megalinedeficiëntie bij muizen en honden veroorzaakt aantoonbaar een afname van de opname van albumine in de proximale tubulus, wat leidt tot albuminurie (Birn et al., 2000; Amsellem et al., 2010). Bovendien lijden patiënten met het Imerslund-Gräsbeck syndroom, veroorzaakt door een mutatie in het cubilin gen, in het algemeen aan proteïnurie, wat het belang van cubilin in de proteïne renale reabsorptie aantoont (Grasbeck, 2006).

Albumin as a Drug Carrier in Oncology

Gezien het versterkte permeatie- en retentie-effect en de accumulatie van albumine in het tumorinterstitium, is de ontwikkeling van albumine als drug carrier steeds belangrijker om te overwegen in termen van de gerichte toediening van kankertherapie (Kratz, 2008, 2010). Er is ook voorgesteld dat dragers van albumine voordeel halen uit de aanwezigheid van albondine op het endotheel en SPARC in het tumorinterstitium om de accumulatie van geneesmiddelen in de tumorruimte te verhogen (Desai et al., 2009; Kratz, 2010). Er zijn verschillende geneesmiddelafgiftesystemen met albumine ontwikkeld, waaronder albumine-nanodeeltjes, geneesmiddel-albumineconjugaten, albumine-bindende geneesmiddelderivaten en prodrugs (voor reviews zie Kratz, 2008, 2010).

De ontwikkeling en marktgoedkeuring van het met paclitaxel beladen albumine-nanodeeltje, nab-paclitaxel of Abraxane®, was een belangrijke doorbraak op het gebied van de ontwikkeling van albumin dragers. Abraxane® werd voor het eerst goedgekeurd voor klinisch gebruik in de Verenigde Staten in 2005 (Kudlowitz en Muggia, 2014). Dit albumine-nanopartikel is geïndiceerd voor de behandeling van uitgezaaide borstkanker, na falen van combinatiechemotherapie (Kudlowitz en Muggia, 2014). Meer recent is Abraxane® ook beschreven voor de eerstelijnsbehandeling van patiënten met gemetastaseerd adenocarcinoom van de pancreas, in combinatie met gemcitabine, en patiënten met lokaal gevorderd of gemetastaseerd niet-kleincellig longcarcinoom, in combinatie met carboplatine (Kudlowitz en Muggia, 2014). Abraxane® heeft een grotere therapeutische index dan paclitaxel alleen en kan in hogere doses worden toegediend met minder toxiciteit en meer werkzaamheid dan de traditionele paclitaxeltherapie (Gradishar et al., 2005; Socinski et al., 2012; Iwamoto, 2013). Abraxane® wordt momenteel nog verder geëvalueerd in klinische studies voor andere tumoren, zoals blaaskanker (NCT00583349) en multipel myeloom (NCT02075021).

Daarnaast wordt ook de binding van albumine als algemene strategie voor de verbetering van de farmacokinetiek van geneesmiddelen geëvalueerd. Traditioneel wordt aangenomen dat de binding van een geneesmiddel aan albumine het niveau van vrij geneesmiddel vermindert dat beschikbaar is om de therapeutische activiteit uit te oefenen (Lancon et al., 2004; Vuignier et al., 2010). Studies hebben echter ook mechanismen aangetoond waardoor albumine het therapeutisch gebruik effectief verbetert of een snelle klaring vermindert (Dennis et al., 2002; Merlot and Richardson, 2014). Zo is aangetoond dat het experimentele antikanker thiosemicarbazon, namelijk di-2-pyridylketon 4,4-dimethyl-3-thiosemicarbazon (Dp44mT) (Merlot et al., 2013a), door kankercellen wordt geïnternaliseerd via een putatieve drager/receptor (Merlot et al., 2013b; Merlot and Richardson, 2014). Interessant is dat de opname, toxiciteit en apoptotische activiteit van Dp44mT sterk wordt versterkt in de aanwezigheid van HSA (Merlot en Richardson, 2014). Gezien het feit dat Dp44mT zich richt op lysosomen om apoptose te induceren (Lovejoy et al., 2011), en dat HSA mogelijk lysosomaal katabolisme ondergaat in tumoren (Andersson et al., 1991; Stehle et al., 1997), kan worden verondersteld dat HSA de levering van Dp44mT aan de lysosomen vergemakkelijkt, waardoor de antikankeractiviteit wordt versterkt (Merlot en Richardson, 2014). Hoewel studies het exacte mechanisme van het HSA-gestimuleerde opnameproces nog moeten identificeren, kan albumine-binding een voordeel bieden bij het genereren van tumor targeting agents en dit vereist verder intensief onderzoek.

Conclusie

Albumine is een veelzijdig en boeiend eiwit. Gezien de grote opsluiting van albumine in de vasculaire en interstitiële ruimte, is de intracellulaire distributie van albumine vele jaren slecht gekarakteriseerd gebleven. Het is mogelijk dat albumine, onder specifieke omstandigheden of tijdens cellulaire stress, wordt opgenomen door normale cellen en tumorcellen in respectievelijk lage en hoge gehaltes, als gevolg van hun metabole snelheid. De precieze rol van sommige onvolledig gekarakteriseerde albumine-bindende eiwitten (d.w.z. hnRNPs en calreticuline) bij het mediëren van de albumine-opname moet nog worden bepaald. Het zoeken en karakteriseren van albumine-bindende eiwitten, met name in kankercellen, is echter van groot belang in het licht van de ontwikkeling van albumine als een effectieve drugdrager om tumoren aan te pakken.

Conflict of Interest Statement

De auteurs verklaren dat het onderzoek werd uitgevoerd in afwezigheid van enige commerciële of financiële relaties die zouden kunnen worden opgevat als een potentieel belangenconflict.

Acknowledgments

Angelica M. Merlot ontvangt een Early Career Research Grant van de Universiteit van Sydney. Des R. Richardson is de ontvanger van een National Health and Medical Research Council (NHMRC) Senior Principal Research Fellowship en Project Grants. Danuta S. Kalinowski ontvangt een NHMRC Project Grant (1048972) en een Helen and Robert Ellis Fellowship van de Sydney Medical School Foundation van The University of Sydney.