Use of SDS to Extract Sorghum and Maize Proteins for Free Zone Capillary Electrophoresis (FZCE) Analysis†

フリーゾーン キャピラリー 電気泳動 (FZCE) 分析用にソルガム (Sorghum bicolor L.Moench.) 貯蔵タンパク質を抽出する2種類の方法が比較された. 60% t-butanolをベースとした従来の溶媒と、アニオン性洗浄剤SDSを含むpH10のホウ酸緩衝液、および60% t-butanolを用いたノンカフィリンの沈殿を比較した。 SDSはすべてのタンパク質の質量に対する電荷を等しくするはずであるにもかかわらず、両方のタイプの抽出物のFZCE分析では同一のパターンが示された。 この方法は、トウモロコシのタンパク質にも適用することに成功した。 t-ブタノールを使ってノンカフィリンを沈殿させ、低いpHで電気泳動を行ったことで、貯蔵タンパク質からSDSが除去されたと考えられる。 SDS抽出の手順により、FZCE分析に適したより安定した抽出液が得られた。 また、これらの抽出物は、SDSキャピラリー電気泳動(SDS-CE)分離に直接使用することも可能であった。 この手順で15種類の遺伝子型からカフィリンを抽出し、FZCEとSDS-CEで分析した。 FZCEによるカフィリンの分解能はSDS-CEよりもはるかに高く、カフィリンタンパク質が比較的小さな分子サイズ分布の中に高いレベルの電荷密度変動を持つことが示された。 FZCEのエレクトロフェログラムには、2つの異なるα-kafirinのグループが見られた。

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