Herpes Simplex Virus

Herpes simplex virus, tipi 1 e 2 (HSV-1 e HSV-2) sono virus del DNA che provocano infezioni che durano tutta la vita e si verificano in tutto il mondo senza distribuzione stagionale. Sono estremamente comuni, con almeno 50 milioni di persone infette negli Stati Uniti. HSV è la causa più comune di lesioni genitali mucocutanee. Il virus si trasmette per contatto diretto con il virus nelle secrezioni con un periodo di incubazione alla presentazione delle lesioni, da 1 a 26 giorni. Il trasporto asintomatico è comune e si pensa che vada dal 25% al 90%, poiché le persone con anticorpi sia per HSV-1 che per HSV-2 non ricordano lesioni orali-labiali o genitali. Quindi la trasmissione subclinica rappresenta la maggior parte delle trasmissioni. Sia le lesioni genitali che quelle oro-labiali possono essere causate da HSV-1 o HSV-2 e sono clinicamente indistinguibili. Nei bambini di età inferiore ai 12 anni, la comparsa di HSV-2 come lesione primaria è meno comune di quella osservata negli adolescenti sessualmente attivi (età 12-18), ma è aumentata negli ultimi 10 anni. Inoltre, c’è stato un aumento dell’HSV-1 come lesione genitale primaria.14

Il rilevamento dell’HSV dipende molto dalla raccolta appropriata dei campioni, dai tempi di raccolta dei campioni rispetto alla presentazione delle vescicole e dal successivo trasporto e trattamento in laboratorio. I campioni non dovrebbero essere raccolti con tamponi di legno o di alginato di calcio perché questi interferiscono con l’isolamento del virus. I tamponi in dacron o rayon dovrebbero essere presentati in un mezzo di trasporto virale (VTM), che è specificamente concepito per i virus e contiene antibiotici per controllare la crescita batterica. Alcuni studi hanno mostrato un recupero migliore quando i campioni sono presentati sul ghiaccio, ma alcuni mezzi di trasporto possono essere conservati e trasportati a temperatura ambiente. I fornitori dovrebbero verificare con il loro laboratorio individuale i parametri di raccolta ottimali raccomandati.14

La coltura virale e/o il test degli anticorpi in immunofluorescenza (FA) dal materiale della lesione sono ancora i pilastri della diagnosi. Il materiale essudativo o i detriti necrotici dovrebbero essere rimossi con un tampone di cotone prima del campionamento della lesione. Un test FA può essere eseguito direttamente dal vetrino ottenuto al letto del paziente o presentato in VTM. La raccolta del campione dovrebbe comportare la rimozione della superficie della lesione vescicolare e la raccolta non solo del fluido ma delle cellule cutanee alla base della lesione. Occorre prestare attenzione a non provocare emorragie perché ciò può interferire con l’esecuzione di alcuni test. Anche gli anticorpi neutralizzanti nel sangue possono interferire con alcuni test. Il test FA su vetrino offre i vantaggi di valutare la qualità del campione presentato (le cellule epiteliali devono essere presenti) e l’esecuzione del test lo stesso giorno dell’acquisizione del campione. Il test è sensibile dal 10% all’87% rispetto alla coltura.14

HSV causa rapidamente l’effetto citopatico (CPE) nelle linee di coltura cellulare suscettibili, tipicamente entro 24-48 ore e il 90% delle colture sono positive entro il 5° giorno. La coltura ha una sensibilità eccellente quando sono presenti lesioni ed è più probabile che sia positiva nei pazienti che hanno lesioni vescicolari rispetto a quelle ulcerative e nei pazienti in cui i campioni sono ottenuti da una prima lesione episodica rispetto a una lesione ricorrente. Gli isolati dovrebbero essere tipizzati per determinare se sono HSV-1 o 2, poiché i tassi di recidiva a 12 mesi sono più comuni con HSV-2 (90%) rispetto a HSV-1 (55%). Mentre la presenza di HSV-2 potrebbe risultare più comunemente in un bambino da una violenza sessuale, i risultati per entrambi HSV-1 e HSV-2 dovrebbero essere esaminati con cautela.9,14 I metodi immunoenzimatici (EIA) non sono abbastanza sensibili in pazienti asintomatici per essere usati con affidabilità e non dovrebbero essere eseguiti in bambini in cui si sospetta un abuso. Una preparazione dello striscio di Tzanck che valuta i cambiamenti citologici associati all’infezione da HSV non è né specifica né abbastanza sensibile da essere usata come test per la diagnosi di HSV.

Le NAAT, come la PCR, hanno dimostrato di essere più sensibili della coltura, specialmente da lesioni crostose e in pazienti con infezione asintomatica.14 Tuttavia, nessuna NAAT è attualmente approvata dalla FDA per il rilevamento di HSV da qualsiasi fonte. Alcuni laboratori hanno convalidato campioni di pelle/lesioni per la NAAT e i fornitori dovrebbero controllare con il loro laboratorio di riferimento individuale per la disponibilità.

I test anticorpali hanno usi limitati ma potrebbero essere utili nella diagnosi in qualcuno con la malattia primaria se si vede un aumento di quattro volte del titolo, specialmente in un paziente in cui il perpetratore è noto per avere una storia di HSV o altre IST e le lesioni genitali non sono notate al momento della visita o al follow-up. È importante richiedere i test basati sulla glicoproteina G tipo-specifica perché sono i soli test affidabili che differenziano tra HSV-1 e HSV-2. I test point-of-care (POCT) attualmente disponibili per HSV-2 possono dare risultati falsamente positivi in popolazioni di pazienti con una bassa probabilità di infezione da HSV, nelle fasi iniziali dell’infezione, e dare risultati falsamente negativi per i pazienti con infezione da HSV-2 che hanno avuto precedenti infezioni da HSV-1. La sieroconversione avviene tipicamente da 2 a 3 settimane prima che questi test possano essere interpretati accuratamente.1,14