Difference Gel Electrophoresis (DIGE)

L’analisi delle proteine sta diventando sempre più una pietra miliare nella decifrazione dei meccanismi molecolari della vita. La proteomica, l’analisi su larga scala e ad alta sensibilità delle proteine, è già fondamentale per le nuove scienze della vita come la biologia e la medicina dei sistemi. La proteomica, tuttavia, si basa molto sui progressi passati e futuri dei metodi di purificazione e analisi delle proteine. La DIGE, essendo in grado di quantificare le proteine nella loro forma intatta, è uno dei pochi metodi che può facilitare questo tipo di analisi e fornire ancora le isoforme proteiche in uno stato MS-compatibile per ulteriori identificazioni e caratterizzazioni con alta sensibilità analitica. Elettroforesi differenziale su gel: Methods and Protocols introduce il concetto di DIGE e i suoi vantaggi nell’analisi quantitativa delle proteine. Fornisce protocolli dettagliati e note importanti sugli aspetti pratici della DIGE con applicazioni sia generiche che specifiche nelle varie aree della proteomica quantitativa. Diviso in quattro sezioni concise, questo volume dettagliato si apre con le basi della DIGE, la tecnica e i suoi dettagli pratici con un focus sulla pianificazione di un esperimento DIGE e la sua analisi dei dati. La sezione successiva introduce vari metodi DIGE, da quelli impiegati dagli scienziati di tutto il mondo a metodi più innovativi, fornendo uno sguardo a ciò che è all’orizzonte nel mondo DIGE. Il volume si chiude con una panoramica della vasta gamma di applicazioni DIGE, dalla proteomica clinica alle applicazioni di proteomica animale, vegetale e microbica. Scritto nel formato di grande successo della serie Methods in Molecular Biology™, i capitoli contengono introduzioni ai rispettivi argomenti, elenchi dei materiali e dei reagenti necessari, protocolli di laboratorio riproducibili passo dopo passo, e note sulla risoluzione dei problemi e sull’evitare le insidie note.

Autorevole e accessibile, Differential Gel Electrophoresis: Methods and Protocols può essere usato dai novizi con un certo background in biochimica o biologia molecolare così come dagli esperti di proteomica che vorrebbero approfondire la loro comprensione della DIGE e il suo impiego in molti settori di applicazione. Con i suoi numerosi protocolli, applicazioni e varianti metodologiche, è anche un riferimento unico per tutti coloro che cercano dettagli fondamentali sul principio di funzionamento della DIGE e idee per possibili usi futuri della DIGE in nuovi approcci analitici.

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